檢測波長:450 nm
所需樣本體積: 50-100ul
適用范圍:僅供科研
保存及有效期:2-8℃，六個月，-20℃一年
檢測目的:用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本。
供應(yīng)的種屬有：大象、牛、大鼠、小鼠、人、馬、兔、大熊貓、類人猿、蜥蜴、蝌蚪、菠菜、羊、犬、魷魚、蝸牛、扁豆、豌豆、馬鈴薯、蟈蟈、豚鼠、倉鼠、金黃地鼠、鵝、鴿子、禿鷲、河馬、犀牛、野豬、東北虎、斑鳩、蚯蚓、鯉魚、眼鏡蛇、青蛙、丹頂鶴、鳥類等動植物種屬

實驗原理

ELISA試劑盒實驗原理：用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗體的微孔中依次加入標本或者標準品、生物素化的抗體、HRP標記的親和素，經(jīng)過徹底洗滌后用底物顯色。底物在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品濃度呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定OD值，計算樣品濃度。

試劑盒組成

1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 7 終止液 6ml×1 瓶

2 酶標試劑 6ml×1 瓶 8 標準品（

4800 pmol/L）

0.5ml×1 瓶

3 酶標包被板 12 孔×8 條 9 標準品稀釋液 1.5ml×1 瓶

4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶 10 說明書 1 份

5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 張

6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 個

樣品類型

　標本必須為液體，不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個標本量收集體積＝100ul×檢測種類。取材前須向銷售人員索要說明書。

樣品采集

　收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天進行檢測的標本，儲存在4℃?zhèn)溆�，如有特殊原因需要周期收集標本�?/span>

試劑盒的優(yōu)點

·特點：
1、靈敏度：有二層含義，1)為試劑檢出被檢物質(zhì)的低量的能力；2)為試劑對大量樣品中陽性檢出的能力;

2、特異性：常用交叉反應(yīng)率表示。含有與待測物相近結(jié)構(gòu)部份的物質(zhì)可能存在交叉反應(yīng)，使測定結(jié)果升高，可能導(dǎo)致假陽性，所以交叉反應(yīng)是評價其質(zhì)量的關(guān)鍵指標;

3、精密度：ELISA試劑一般指其批內(nèi)CV%，其值應(yīng)小于15%；定量試劑應(yīng)同時考察線性范圍;

4、準確度：通過添加回收實驗進行評價;

5、簡便性：指在不影響試劑的前三項指標的前題下，實驗和測定步驟越少越好，在定性實驗中結(jié)果判斷簡單明了，定量試驗結(jié)果計算也應(yīng)簡單;

6、安全性：指試劑對操作者和環(huán)境安全無害無傳染性;

7、經(jīng)濟性：試劑在同等質(zhì)量條件下通過大規(guī)模生產(chǎn)或技術(shù)進步降低成本，而市場價格比較合理;

8、試劑評價：需要有權(quán)威的確證方法和確證的樣品進行檢測。

人異丙腎上腺素(iso-Hyd)ELISA試劑盒 實驗前的準備

1仔細閱讀說明書

2確定試劑盒在有效期內(nèi)

3按說明書確定所有試劑齊全(數(shù)量、體積)

4標本制備要規(guī)范，每份標本體積要按2-3個復(fù)孔以上的量制備(貯存)，盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實驗者，注意低溫保存

5準備好所有實驗額外所需物品，如試管、吸頭、移液器、離心機等

6根據(jù)檢測標本數(shù)量確定所需試劑的量

7按說明書將所用試劑平衡至室溫，配制所需試劑

操作步驟

1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

2400 pmol/L 5 號標準品 150μl 的原倍標準品加入150μl 標準品稀釋液

1200 pmol/L 4 號標準品 150μl 的5 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

600 pmol/L 3 號標準品 150μl 的4 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

300 pmol/L 2 號標準品 150μl 的3 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

150 pmol/L 1 號標準品 150μl 的2 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5 倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。

4. 配液：將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒后棄去，如此重復(fù)5 次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。測定應(yīng)在加終止液后15 分鐘以內(nèi)進行。

用于檢測未知抗體的間接法：

用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃過夜。次日洗滌3次。

　　↓ 　　

加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。（同時做空白、陰性及陽性孔對照）

　　↓ 　　

于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體（抗抗體）0.1ml，　　37℃孵育30-60分鐘，洗滌,后一遍用DDW洗滌。

　　↓

加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。

↓

終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。

↓

結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

計算方法

以標準物的濃度為橫坐標，OD 值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD 值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD 值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD 值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。

注意事項

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間好控制在5 分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4．請每次測定的同時做標準曲線，好做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD 值大于標準品孔第一孔的OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測定，計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物請避光保存。

7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9．本試劑不同批號組分不得混用。

配送服務(wù)

產(chǎn)品包裝：在采樣、發(fā)送、運輸過程中有保冷溫度要求的，公司均采用加厚款生物保溫箱，內(nèi)裝生物冰袋，有效的控制產(chǎn)品溫度，保證貨物質(zhì)量不受影響，同時并填充大量EPE發(fā)泡棉，具有優(yōu)越的緩沖彈性，它就像成千上萬的小彈簧緊緊地保護在郵寄物品周圍，它能有效的吸收嚴酷的沖擊力，使郵寄物品免于破損，保證貨物完好送達您手。

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人異丙腎上腺素(iso-Hyd)ELISA試劑盒 源自先進酶聯(lián)免疫技術(shù)，涵蓋國內(nèi)外專家的經(jīng)驗與智慧。采用先進的技術(shù)和設(shè)備，確保品質(zhì)的同時，降低成本，為更多有需要的研究人員，節(jié)省實驗經(jīng)費，保證實驗質(zhì)量，多家生物科研基地合作伙伴，實力團隊傾力打造專注于elisa試劑盒的生產(chǎn)，研發(fā)，助力科研!