ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)對(duì)照各有所用:一般陽性對(duì)照是用來檢測(cè)試驗(yàn)系統(tǒng)是否正確,若陽性對(duì)照為陰性,說明檢測(cè)系統(tǒng)不正確;陰性對(duì)照一般是用無關(guān)抗原,陰性對(duì)照通常是排除試劑盒檢測(cè)中是否存在非特異性吸附現(xiàn)象,若陰性對(duì)照為陽性,說明抗體能夠非特異性結(jié)合無關(guān)抗原,那么用于檢測(cè)標(biāo)本,其特異性就值得懷疑了;空白對(duì)照主要是檢測(cè)各個(gè)步驟中試劑是否有問題,也可以檢測(cè)是否有非特異性吸附現(xiàn)象,具體又可以分包被空白對(duì)照、抗原空白對(duì)照、一抗空白對(duì)照、酶標(biāo)抗體空白對(duì)照……,正規(guī)的商品化的試劑盒經(jīng)過條件優(yōu)化,只需要做抗原的空白對(duì)照,可以看一下顯色系統(tǒng)是否正常,若顯色,則說明顯色液有問題.
ELISA實(shí)驗(yàn)中為了消除和減少孔與孔之間的差異,標(biāo)準(zhǔn)品或陰性對(duì)照通常做2-3個(gè)復(fù)孔(甚至更多),建議復(fù)孔設(shè)在不同的板條上并且每塊板都要設(shè)對(duì)照。結(jié)果計(jì)算正如你所說,取其算術(shù)平均值就可以了。
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