我司技術(shù)員根據(jù)自身經(jīng)驗(yàn)總結(jié)了一篇ELISA實(shí)驗(yàn)心得及操作技巧,發(fā)布出后得到了業(yè)內(nèi)人士的高度關(guān)注。本周就ELISA試劑盒的顯色弱問題我司的ELISA咨詢顧問給出了具體分析
ELISA顯色弱的可能原因 | 對應(yīng)的解決方法 |
超過有效期的產(chǎn)品可能會產(chǎn)生很弱的信號 | 檢查產(chǎn)品的有效期 |
加入試劑的體積和時間有誤 | 確定所使用的每一個試劑的體積正確的和加入的時間是適當(dāng)?shù)?/span> |
試劑、樣品用前未能平衡 | 用前試劑、樣品置室溫平衡10分鐘左右 |
縮短孵育時間能使實(shí)驗(yàn)的信號變?nèi)?/span> | 檢查孵育的時間 |
在溫度變化的環(huán)境內(nèi)孵育酶標(biāo)板 | 確定孵育的溫度,應(yīng)避免溫度的變化 |
使用了被污染的試劑 | 檢查試劑是否被污染 |
標(biāo)準(zhǔn)品/標(biāo)本制備方法不規(guī)范 | 檢查標(biāo)準(zhǔn)品/標(biāo)本的制備,標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)按說明書進(jìn)行復(fù)溶和稀釋。低溫貯存的標(biāo)本避免反復(fù)凍融,嚴(yán)禁使用溶血標(biāo)本。樣品用NaN3防腐,抑制了酶的反應(yīng) |
顯色底物制備不規(guī)范 | 檢查底物的制備,如體積是否正確,混合是否恰當(dāng)充分 |
檢測時間不當(dāng) | 是否在規(guī)定的時間內(nèi)檢測 |
儀器設(shè)定不正確,濾光片不匹配 | 儀器是否設(shè)定正確,濾光片的使用等 |
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