TNF-α 及白細(xì)胞介素參與兒童炎癥性腸病發(fā)病的作用研究
關(guān)鍵詞: 兒童; 炎癥性腸病; TNF?α; 白細(xì)胞介素; 腸道菌群
中圖分類號(hào): R 574 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A 文章編號(hào): 1672-2353( 2015) 17-192-02 DOI: 10. 7619 / jcmp. 201517073
炎癥性腸病( IBD) 包括克羅恩病( CD) 及潰瘍性結(jié)腸炎( UC) ,是一組非特異性慢性腸道炎癥,易反復(fù)發(fā)作,嚴(yán)重影響患兒學(xué)習(xí)及生活質(zhì)量[1]。IBD 發(fā)病機(jī)制尚不明確,但目前普遍認(rèn)為多種細(xì)胞炎癥因子參與介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)在 IBD 發(fā)病過程中起到重要的作用[2]。TNF ?α,IL -23是新近發(fā)現(xiàn)參與 IBD 炎癥反應(yīng)的細(xì)胞因子,IL-23可通過介導(dǎo) Th17 細(xì)胞而大量生成 IL-17 擴(kuò)大炎癥反應(yīng),TNF?α 在 IBD 中可引起機(jī)體免疫炎癥反應(yīng),使得炎癥過程持續(xù)加重[3]。近年研究[4] 發(fā)現(xiàn),IBD 病情的發(fā)生及進(jìn)展除了與炎癥因子表達(dá)異常有關(guān)外,還與腸道菌群結(jié)構(gòu)變化有關(guān)。本研究探討小兒炎癥性腸病外周血炎癥因子水平的變化及意義,并觀察 IBD 患兒腸道菌群結(jié)構(gòu)的變化,分析二者在 IBD 發(fā)病中的關(guān)系及作用機(jī)制。
1. 1 臨床資料
選取 2014 年 4 月—2015 年 4 月 65 例兒童IBD 患兒為研究對(duì)象,均符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)消化病學(xué)會(huì)炎癥性腸病協(xié)會(huì)制定的診斷標(biāo)準(zhǔn),患兒家屬 均簽署知情同意書。同時(shí)排除自身免疫性疾病、嚴(yán)重心腦血管疾病、合并腹膜炎、腸穿孔、巨結(jié)腸 者、心肺功能不全者及其他炎癥反應(yīng)性疾病。其 中克羅恩病( CD 組) 30 例,男 18 例,女 12 例,年齡 3 ~ 12 歲,平均( 7. 25 ± 1. 58) 歲; 潰瘍性結(jié)腸炎( UC 組) 35 例,男 22 例,女 13 例,年齡 3 ~ 13 歲,平均( 6. 98 ± 1. 39 ) 歲; 健康體檢兒童( 對(duì)照組) 25 例,男 17 例,女 18 例,年齡 3 ~ 12 歲,平均
1. 2方法
1. 2. 1腸道菌群數(shù)量檢測: 取 3 組患兒新鮮糞便
0. 5 g,采用蒸餾水將糞便稀釋,取稀釋液 10 μL進(jìn)行接種培養(yǎng),大腸桿菌、腸球菌采用需氧培養(yǎng)基 培養(yǎng),雙歧桿菌、乳酸桿菌采用厭氧基培養(yǎng)液進(jìn)行 培養(yǎng),于 37 ℃ 下恒溫培養(yǎng) 48 h,觀察菌落數(shù)量。細(xì)菌經(jīng)革蘭染色后,在高倍鏡下進(jìn)行鑒定,計(jì)算每 克糞便含細(xì)菌數(shù)量( CFU / g) ,結(jié)果以對(duì)數(shù)形式表示。
1. 2. 2血清炎癥因子檢測: 分別于清晨空腹收集患者靜脈血 3 mL,經(jīng)離心處理后留取患者上清液,采用 ELISA 法測定各組血清炎癥因子水平。TNF?α 試劑盒由上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司提供,
1. 3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
采用 SPSS17. 0 對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,組間數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差以均數(shù) ± 標(biāo)準(zhǔn)差表示,組間計(jì)量資料采用成組 t 檢驗(yàn),多組計(jì)量資料采用方差分析,進(jìn)一步兩兩分析采用 LSD 檢驗(yàn),相關(guān)性采用 Spearman 相關(guān)性分析,P < 0. 05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2. 1 各組炎癥因子水平對(duì)比
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