人白介素6(IL-6)ELISA檢測(cè)試劑盒為我司的熱銷(xiāo)產(chǎn)品,近日,有客戶(hù)來(lái)電就人白介素6(IL-6)ELISA檢測(cè)試劑盒樣品收集 處理及保存方法提出咨詢(xún),我司技術(shù)部整理分析如下：

樣品收集 處理及保存方法

1）血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激.使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管.收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離.

2）血漿-----EDTA 檸檬酸鹽 肝素血漿可用于檢測(cè).1000×g離心30分鐘去除顆粒.

3）細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物.

4）組織勻漿-----將組織加入適量shengli鹽水搗碎.1000×g離心10分鐘,取上清液

5）保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍.盡可能的不要使用溶血或高血脂血.如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾.不要在37℃或更高的溫度加熱解凍.應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍.

操作步驟：

 1）使用前,將所有試劑充分混勻.不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差.

2）根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù).每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔.每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔.標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi).

3）加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔 加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi).立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體.蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí).

4）甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干.重復(fù)此操作3次.如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次.

5）每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘.

6）甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干.重復(fù)此操作3次.如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次.

7）每孔加入底物A B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘.避免光照.

8）取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果.

9）在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值.

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