在做ELISA實(shí)驗(yàn)的時(shí)候,很多人都會(huì)產(chǎn)生疑問,為什么大多都是用血清來檢測(cè)呢?那么今天上海恒遠(yuǎn)就給大家解說一下.
ELISA其實(shí)是可以測(cè)一些組織 細(xì)胞等樣本的,但是由于組織 細(xì)胞是固體樣本,要對(duì)其進(jìn)行破碎,提取被檢物質(zhì);而在提取被檢物質(zhì)時(shí)破碎方式(如機(jī)械破碎 超聲破碎 裂解液裂解等) 提取液的成份等存在差異,最終導(dǎo)致提取程度有所差異,從而難以建立正常參考值;而血清或血漿樣本就不存在因提取過程導(dǎo)致的偏差并且采集時(shí)又非常方便,因此通常臨床常采用血清 血漿做為檢測(cè)對(duì)象.
使用注意事項(xiàng):
1 Elisa試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存.
2 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果.
3 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差.一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣.
4 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔.如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔OD值的),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5).
5 嚴(yán)格按說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
6 本試劑不同批號(hào)組分不得混用.
7 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染.
8 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理.
9 底物請(qǐng)避光保存.