相信購買過ELISA試劑盒的朋友們都知道試劑盒里面沒有裝備酶標儀,但是想要做ELISA實驗酶標儀又是必不可少的,那到底酶標儀是個什么東東呢?
酶標儀實際上就是一臺變相的專用光電比色計或分光光度計,其基本工作原理與主要結構和光電比色計基本相同.是一種單通道自動進樣的酶標儀工作原理圖.光源燈發(fā)出的光波經過濾光片或單色器變成一束單色光,進入塑料微孔極中的待測標本.該單色光一部分被標本吸收,另一部分則透過標本照射到光電檢測器上,光電檢測器將這一待測標本不同而強弱不同的光信號轉換成相應的電信號.電信號經前置放大,對數(shù)放大,模數(shù)轉換等信號處理后送入微處理器進行數(shù)據(jù)處理和計算,最后由顯示器和打印機顯示結果.微處理機還通過控制電路控制機械驅動機構X方向和Y方向的運動來移動微孔板,從而實現(xiàn)自動進樣檢測過程.而另一些酶標儀則是采用手工移動微孔板進行檢測,因此省去了X,Y方向的機械驅動機構和控制電路,從而使儀器更小巧,結構也更簡單.
光是電磁波,波長100nm~400nm稱為紫外光,400nm~780nm之間的光可被人眼觀察到,大于780nm稱為紅外光.人們之所以能夠看到色彩,是因為光照射到物體上被物體反射回來.綠色植物之所以是綠色,是因為植物吸收的大部分為紅橙光和藍紫光,但對綠色不吸收,反射出來,所以植物呈現(xiàn)為綠色.酶標儀測定的原理是在特定波長下,檢測被測物的吸光值.
檢測單位
光通過被檢測物,前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量,特定波長下,同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關系.
檢測單位用OD值表示, OD是optical density(光密度)的縮寫,表示被檢測物吸收掉的光密度, OD=log(1/trans),其中trans為檢測物的透光值.根據(jù)Bouger-amberT-beer法則,OD值與光強度成下述關系:
E=OD=log(lo/Ι) 其中E表示被吸收的光密度, Ιo 為在檢測物之前的光強度,Ι為從被檢測物出來的光強度.