1 根據(jù)實(shí)驗(yàn)物種及待檢樣品性質(zhì)來選擇ELISA

如果實(shí)驗(yàn)君的實(shí)驗(yàn)樣品為人 小鼠或大鼠樣品,那么要選擇一個(gè)合適的試劑盒相對(duì)容易,但如果您的實(shí)驗(yàn)樣品來源于其他物種如雞 牛 猴等,則市面上能提供的試劑盒種類卻很少.且不可輕信能提供近萬種試劑盒,覆蓋多物種的供應(yīng)商.但如果又非要檢測(cè)這些物種的指標(biāo)時(shí),最好要對(duì)待檢物(如有種屬差異性)進(jìn)行同源性分析以及試劑盒的種屬交叉反應(yīng)數(shù)據(jù).對(duì)于樣品類型而言,一般的商業(yè)化試劑盒都經(jīng)過血清 血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清液的驗(yàn)證.在選擇試劑盒時(shí),最好要詳細(xì)閱讀說明書,比如血漿樣本抗凝劑的使用是否與試劑盒兼容.另外,在某些情形下樣品中會(huì)存在干擾因素比如溶血血漿 高脂肪含量的樣品 人抗鼠抗體(HAMA) 細(xì)胞培養(yǎng)上清中含胎牛血清等.因此需根據(jù)樣品來選擇試劑盒,必要時(shí)還要根據(jù)樣本來適當(dāng)優(yōu)化.或在樣品收集前,最好先閱讀一些可靠供應(yīng)商試劑盒的說明書或直接咨詢.如果您的樣品為組織或細(xì)胞裂解物,則需要更謹(jǐn)慎的選擇試劑盒.

 

2 供應(yīng)商資質(zhì)評(píng)估

縱觀國(guó)內(nèi)外ELISA試劑盒供應(yīng)商,估計(jì)至少100余家.有些供應(yīng)商可提供數(shù)百種常用指標(biāo)ELISA,然而有些供應(yīng)商則聲稱可提供數(shù)千種甚至上萬種指標(biāo)的試劑盒,但質(zhì)量參差不齊,更有濫竽充數(shù)禍害科研之輩.那如果選擇供應(yīng)商呢？從同行或?qū)嶒?yàn)室同僚了解供應(yīng)商的口碑,售前售后的處理情況；文獻(xiàn)引用是王道,尤其是SCI期刊文章對(duì)供應(yīng)商產(chǎn)品的引用；了解供應(yīng)商的研發(fā)歷史和品牌史,很多供應(yīng)商頻頻更換公司名或更換公司注冊(cè)地,其中名堂實(shí)驗(yàn)君應(yīng)該能悟出.不要迷信國(guó)外“品牌”,國(guó)外“品牌”不代表是國(guó)際知名品牌.很多打著國(guó)外旗號(hào)的公司,其實(shí)就是空殼的皮包公司,從全球OEM劣質(zhì)產(chǎn)品.國(guó)外供應(yīng)商也有售后不給力的時(shí)候.

 

3 根據(jù)樣本可獲得性來選擇試劑盒

通常而言,商業(yè)化試劑盒的樣品用量都在50ul或100ul, 但也有一些供應(yīng)商的試劑盒對(duì)樣品的用量要求可少至10ul.如果您的樣品很珍貴或較難獲取,則需要認(rèn)真考慮試劑盒對(duì)樣品用量的要求.如果樣品量少,且要做多因子檢測(cè)時(shí)更需謹(jǐn)慎.

 

4 認(rèn)清訂購(gòu)渠道

不論是國(guó)際還是國(guó)內(nèi)品牌ELISA試劑盒,都需要在訂購(gòu)前先與生產(chǎn)廠商詳細(xì)溝通產(chǎn)品細(xì)節(jié)（比如酶標(biāo)板是否可拆卸）,了解售前售后技術(shù)服務(wù)能力等.然后咨詢其官方訂購(gòu)渠道,比如直接向廠家訂購(gòu)或通過中國(guó)區(qū)或省級(jí)授權(quán)代理商經(jīng)銷商訂購(gòu).

 

5 根據(jù)樣品中檢測(cè)物水平來選擇試劑盒

如果實(shí)驗(yàn)君對(duì)于樣品中待檢物的水平?jīng)]有任何可參考的數(shù)據(jù),最好選擇寬動(dòng)力學(xué)檢測(cè)范圍的試劑盒.如果樣品中待檢物的含量很低,建議選擇高靈敏度的試劑盒.為了降低基質(zhì)效應(yīng),有必要用稀釋液至少做2倍稀釋.如果樣品中待檢物含量遠(yuǎn)超過試劑盒的檢測(cè)范圍（標(biāo)曲范圍）,也需做適當(dāng)?shù)谋稊?shù)稀釋.在最后計(jì)算結(jié)果時(shí),需乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù).

 

6 ELISA試劑盒的關(guān)鍵技術(shù)參數(shù)包括板內(nèi)差異性 板間差異性 批間差異性 重復(fù)性 特異性及交叉反應(yīng)性 回收率等.如果實(shí)驗(yàn)君經(jīng)常開展ELISA實(shí)驗(yàn),建議使用同一廠家的試劑盒,這樣可盡量保證數(shù)據(jù)的重復(fù)性(當(dāng)然前提是實(shí)驗(yàn)條件的一致性).