在處理植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，一不小心會(huì)出現(xiàn)各種污染，到底該如何預(yù)防呢？恒遠(yuǎn)生物技術(shù)人員為大家總結(jié)，一起來(lái)看看吧！
一、污染原因判斷：
1.培養(yǎng)基污染：若污染菌類是零星分散在培養(yǎng)基中，則可確定是人為引起的污染。比如培養(yǎng)基滅菌不徹底，開(kāi)瓶時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，滅菌后存放時(shí)間過(guò)長(zhǎng)等； 高溫蒸汽滅菌器的溫度、壓力、時(shí)間沒(méi)有正確設(shè)置；過(guò)濾滅菌過(guò)程中濾膜孔徑選擇、過(guò)濾滅菌器的滅菌處理、過(guò)濾滅菌操作等均會(huì)影響培養(yǎng)基的滅菌效果。措施：嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)要求，滅菌規(guī)程操作。
2.外植體污染：若污染菌類是從材料周圍長(zhǎng)起，且發(fā)生在 5 天以后，則說(shuō)明是材料帶的內(nèi)生菌�？赡苁墙臃N用具滅菌不徹底，接種時(shí)材料被污染；若從培養(yǎng)基以下開(kāi)始長(zhǎng)菌，發(fā)生時(shí)間較早，且有從里向外的趨勢(shì)，則說(shuō)明是切口引起的污染，原因可能是未剪去兩個(gè)切口或者雖剪去切口但是所用器具帶菌；或者是未及時(shí)發(fā)現(xiàn)污染苗，接種過(guò)程中引起交叉污染；措施：取材時(shí)應(yīng)仔細(xì)選擇，以減少污染的發(fā)生。
3.操作環(huán)節(jié)污染：接種室是否清潔、干燥、密封，是否經(jīng)常用紫外燈照射、甲醛熏蒸、70% 的酒精噴霧殺菌等；超凈工作臺(tái)擺放物品雜亂，長(zhǎng)時(shí)間不換濾網(wǎng)，導(dǎo)致凈化能力降低；接種用具滅菌不徹底引起污染；操作不正確等。
措施：每次接種前半個(gè)小時(shí)，用 20% 的新潔爾擦洗室內(nèi)設(shè)備、工作臺(tái)面，再用紫外燈照射 20 min。還可以噴灑 70% 的乙醇進(jìn)行消毒。除了培養(yǎng)基、接種材料、器具和用具保證無(wú)菌外，同時(shí)在接種時(shí)還需要嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作。
二、出現(xiàn)污染后處理措施：
1.真菌污染后，如果已形成孢子，則必須經(jīng)高壓滅菌后扔掉；若使細(xì)菌污染，只要及時(shí)發(fā)現(xiàn)，將材料上部未感染菌的部分剪下轉(zhuǎn)接，材料仍可以用。
2.用抗生素等殺菌藥劑的處理。但至今還未發(fā)現(xiàn)哪種抗生素能夠?qū)Ω鞣N菌都有效，并且常常也會(huì)影響植物材料的正常生長(zhǎng)分化。另一些藥劑，雖有的殺菌效果好，但往往容易引起鹽害，也無(wú)法利用。
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