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ELISA試劑盒靈敏度低?
發(fā)布時間:2024/9/26 9:32:54 已瀏覽次數(shù): 73 次

近日,有客戶在做完實驗后,反映陽性對照、質控在內的所有板孔顏色均較淡。這是什么原因造成的?我司技術整理后給出如下解析,邀您來看看!

 
容易造成的原因有:
1.試劑盒必須在有效期內使用, 超過有效期的產品可能會產生很弱的信號;
2.試劑盒沒有按規(guī)定進行保存,受高溫影響;
3.試劑、樣品用前未平衡至室溫;
4.加入試劑的體積和時間有誤,移液器計量不準,吸嘴內水分太多或不清潔;
5.洗板及加樣過程中,酶標受污染失活而失去催化顯色劑顯色的能力;
6.孵育時間及孵育溫度未達到要求 ,反應板放入培養(yǎng)箱時注意溫度并及時調整;
7.洗板次數(shù)過多,或濃縮洗液稀釋倍數(shù)不符合要求;洗滌沖擊力太大。浸泡時間太長;
8.顯色劑加量不足或順序顛倒,或混合后加入;
9.底物作用時間不夠;
10.蒸餾水水質有問題。
 
解決辦法:
1.實驗前檢查試劑的組分及批號,確認試劑未過期。
2.不要將試劑盒長時間置于常溫下,按使用規(guī)定儲藏。
3.確定所使用的試劑體積正確,加入時間適當。
4.校正移液器,移液器與吸嘴配合要緊密吻合。移液不宜太快,排放應完全。
5.確認盛酶標的容器不含酶抑制劑如疊氮鈉等,確認配制洗液的容器已洗干凈,確認配制洗液的純化水達到要求且未受污染。
6.孵育溫度應控制在 37-38℃,孵育時間嚴格按照說明書操作。保溫期內不宜多開門,以免影響保溫。
7.嚴格按說明書要求稀釋濃縮洗液及洗板,減小洗滌沖擊力,按說明書要求置留洗滌液時間和洗滌次數(shù)。
8.顯色劑滴瓶垂直向下,持力均勻,滴速不宜過快,先加顯色劑 A,后加顯色劑B,不可將A、B液混合后加入
9.準確定時。
10.測定蒸餾水配制試劑對酶免疫法的影響。
 

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