產(chǎn)品參數(shù)
T4 DNA連接酶參數(shù)
英文名稱:T4 DNA Ligase
CAS號:9015-85-4
分子量:55.3kDa,單體
級別: BR
來源:含有T4噬菌體克隆基因30的大腸桿菌
濃度:30Weiss u/ul(6000CEU/ul)
活性定義:是指在ATP-PPi交換反應(yīng)中,37℃、30分鐘內(nèi)將1nmol [32PPi]轉(zhuǎn)換為Norit可吸收形式所需的酶量(weiss單位,1個weiss單位相當(dāng)于約200個粘性末端連接單位。1個粘性末端連接單位:20ul反應(yīng)體系(50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)的5-DNA末端)中,在16℃、30分鐘內(nèi)連接50%連接HindIII酶切的Lambda DNA 產(chǎn)物所需的酶量)
酶活性分析混合物:66mM Tris-HCL(PH7.6), 10mM DTT, 6.6mM MgCL2, 0.066mM ATP, 3.3uM[32PPi]
保存液組分:20mM Tris-HCL(PH7.5), 50mM KC1, 1mM DTT,0.1mM EDTA和50%(v/v)甘油
10×T4 DNA Ligase緩沖液(#B69):400mM Tris-HCL, 100mM MgCL2, 100mM DTT, 5mM ATP(PH7.5,25℃)
抑制劑:當(dāng)反應(yīng)體系中NaC1或KC1的濃度超過200 mM時(shí),可強(qiáng)烈抑制T4 DNA Ligase活性
失活:65℃加熱10分鐘或70℃加熱5分鐘
注意:T4 DNA Ligase與DNA結(jié)合會改變條帶的瓊脂糖凝膠電泳遷移率,為避免此現(xiàn)象,電泳前需處理樣本或分子量標(biāo)準(zhǔn)。樣本處理如下:樣本與Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液(#R1151)混合,75℃加熱5分鐘或65℃加熱10分鐘后冰浴保存;轉(zhuǎn)化時(shí),連接產(chǎn)物的體積不得超過感受態(tài)細(xì)胞體積中的10%;電轉(zhuǎn)化之前,先用lvfang抽提方法除去連接混合物中的T4 DNA Ligase,然后經(jīng)乙醇沉淀純化抽提產(chǎn)物
質(zhì)量控制:測試表明無內(nèi)切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能檢測:粘性末端或平末端DNA的連接能力
性狀:液體。該酶催化雙鏈DNA或RNA中毗鄰的5'磷酸基團(tuán)和3'-羥基末端之間形成磷酸二酯鍵,還可以修復(fù)雙鏈DNA、RNA或DNA/RNA復(fù)合體中的單鏈切口,連接DNA的粘性和平末端,但該酶對單鏈核酸無酶活性。該酶需要輔因子ATP
用途:生化研究。粘性末端或平末端雙鏈DNA的連接;雙鏈寡核苷酸接頭與雙鏈DNA連接;雙鏈DNA、RNA或DNA-RNA復(fù)合體中缺口的修復(fù);連接酶介導(dǎo)的RNA檢測;位點(diǎn)特異性突變;擴(kuò)增片段長度多態(tài)性
保存: -20°C
公司介紹
上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司座落于風(fēng)景秀麗的上海閔行科技工業(yè)園區(qū)內(nèi),是一家品牌試劑代理商。我司代理進(jìn)口Elisa試劑盒,生物試劑,標(biāo)準(zhǔn)品,培養(yǎng)基。公司采用先進(jìn)的檢驗(yàn)技術(shù)及設(shè)備、人性化的辦公環(huán)境,讓所有員工在舒適的環(huán)境中工作和生活。公司成立以來,匯聚了一批充滿活力、高效務(wù)實(shí)的技術(shù)人才和一支嚴(yán)密矩陣的管理隊(duì)伍。同時(shí),引進(jìn)國內(nèi)外的優(yōu)秀企業(yè)的先進(jìn)技術(shù),更加促進(jìn)了公司的進(jìn)步和提高了為客戶服務(wù)的能力。
安全操作
T4 DNA連接酶操作
1. 實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)準(zhǔn)溫度為20℃,一般檢測間及試驗(yàn)間的溫度應(yīng)在20±5℃, 線值計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)間為20±2℃,電工與無線電專業(yè)的標(biāo)準(zhǔn)間和線值計(jì)量的計(jì)量檢測儀器間為20±3℃。
2. 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的相對濕度一般應(yīng)保持在50-70%。
3. 實(shí)驗(yàn)室的噪音、防震、防塵、防腐蝕、防磁與屏蔽等方面的環(huán)境條件應(yīng)符合在室內(nèi)開展的檢定項(xiàng)目之檢定規(guī)程和計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)器具及計(jì)量檢測儀器設(shè)備對環(huán)境條件的要求,室內(nèi)采光應(yīng)利于檢定工作和計(jì)量檢測工作的進(jìn)行。
化學(xué)試劑純度等級
純度等級 | 優(yōu)級純 | 分析純 | 化學(xué)純 | 實(shí)驗(yàn)試劑 |
英文代號 | G.R. Guarantee Reagent | A.R. Analytical Reagent | C.P. Chemical Pure | L.R. Laboratory Reagent |
瓶簽顏色 | 綠色 | 紅色 | 藍(lán)色 | 黃色 |
適用范圍 | 用作基準(zhǔn)物質(zhì),主要用于精密的科學(xué)研究和分析實(shí)驗(yàn)。 | 用于一般科學(xué)研究和分析實(shí)驗(yàn)。 | 用于要求較高的無機(jī)和有機(jī)化學(xué)實(shí)驗(yàn),或要求不高的分析檢驗(yàn)。 | 用于一般的實(shí)驗(yàn)和要求不高的科學(xué)實(shí)驗(yàn)。 |
國外試劑純度級別說明
T4 DNA連接酶說明
Ultra Pure:超純,與GR級相近。
High Purity:高純,與AR級相近。
Biotech:生物技術(shù)級,與BR級相近。
Reagent:試劑級,與CP級相近。
ACS:美國化學(xué)學(xué)會標(biāo)準(zhǔn),與AR級相近。
USP:藥用級
公司其他產(chǎn)品溫馨提示
首先要注意有效期,盡量買剛出廠不久的。大家更多的了解試劑盒無非就是擔(dān)心實(shí)驗(yàn)?zāi)芊癯晒,試劑盒結(jié)果出來以后如何解釋。只要是商品化試劑盒,都是比較穩(wěn)定的,但一般檢測抗原不如檢測抗體準(zhǔn)確度高。
文檔名稱
文檔類型
文件大小
小鼠酮體(KB)ELISA試劑盒說明書
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