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人沙眼衣原體熱休克蛋白60抗體（CHSP60 Ab）酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書 定性

[商品編號]:H-13523

[CAS]：

[英文名稱]：

[分子式]：

[分子量]：[品　　牌]：上海恒遠(yuǎn)

[庫　　存]： 500 個(gè)

[數(shù)　　量]：

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產(chǎn)品描述

 

人沙眼衣原體熱休克蛋白60抗體(CHSP60 Ab)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
規(guī)格：96T/48T
 
使用目的：
本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中沙眼衣原體熱休克蛋白60抗體(CHSP60 Ab)表達(dá)。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中人沙眼衣原體熱休克蛋白60抗體(CHSP60 Ab)表達(dá)。用純化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，可與樣品中沙眼衣原體熱休克蛋白60抗體(CHSP60 Ab)相結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合，形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），與CUTOFF值相比較，從而判定標(biāo)本中人沙眼衣原體熱休克蛋白60抗體(CHSP60 Ab)的存在與否。
試劑盒組成

1
30倍濃縮洗滌液
20ml×1瓶
7
終止液
6ml×1瓶
2
酶標(biāo)試劑
6ml×1瓶
8
陽性對照
0.5ml×1瓶
3
酶標(biāo)包被板
12孔×8條
9
陰性對照
0.5ml×1瓶
4
樣品稀釋液
6ml×1瓶
10
說明書
1份
5
顯色劑A液
6ml×1瓶
11
封板膜
2張  
6
顯色劑B液
6ml×1/瓶
12
密封袋
1個(gè)

標(biāo)本要求 
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
1. 編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板應(yīng)設(shè)陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
2. 加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白孔調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
 
計(jì)算和結(jié)果判定：
  試驗(yàn)有效性：陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.20
  臨界值（CUT OFF）計(jì)算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
  陰性判定：樣品OD值< 臨界值（CUT OFF）者為沙眼衣原體熱休克蛋白60抗體(CHSP60 Ab)陰性
  陽性判定：樣品OD值≥ 臨界值（CUT OFF）者為沙眼衣原體熱休克蛋白60抗體(CHSP60 Ab)陽性
。
注意事項(xiàng)
1．操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行，本試劑不同批號組分不得混用。
2．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
3．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
4． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5．底物請避光保存。
6．試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)，使用雙波長檢測時(shí)，參考波長為630nm
7．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為2M的硫酸，使用時(shí)必須注意安全。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6個(gè)月
 

  • 文檔名稱

    文檔類型

    文件大小

  • 小鼠酮體（KB）ELISA試劑盒說明書

    (pdf)

    201 KB

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    184 KB

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