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植物葉綠素(chlorophyll)ELISA試劑盒

[商品編號(hào)]:chlorophyll

[CAS]:無(wú)

[英文名稱]:

[分子式]:

[分子量]:[品  牌]:上海恒遠(yuǎn)

[庫(kù)  存]: 500 個(gè)

[數(shù)  量]:

我要詢價(jià)

產(chǎn)品描述

 

  【產(chǎn)品文獻(xiàn)支持】

 

影響因子(IF)=3.02;Transcriptome Characterization of Cymbidium sinense'Dharma' Using 454 Pyrosequencing and Its Application in the Identification of Genes Associated with Leaf Color Variation

華中農(nóng)業(yè)大學(xué);《PLOS ONE》

【產(chǎn)品文獻(xiàn)支持】

影響因子(IF)=3.93;Cytological, physiological, and transcriptomic analyses of golden leaf coloration in Ginkgo biloba L;揚(yáng)州大學(xué);《Horticulture Research》

植物葉綠素(chlorophyll)ELISA試劑盒 

 

使用說(shuō)明書(shū)

 

 

本試劑盒僅供研究使用。

 

 

規(guī)格:96T

檢測(cè)范圍: 5 pmol/L -160 pmol/L 

使用目的: 本試劑盒用于測(cè)定植物組織,細(xì)胞相關(guān)樣本中葉綠素(Chlorophyll)含量。

實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中植物葉綠素(Chlorophyll)水平。用純化的植物葉綠素(Chlorophyll)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入葉綠素(Chlorophyll),再與HRP標(biāo)記的葉綠素(Chlorophyll)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的葉綠素(Chlorophyll)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中植物葉綠素(Chlorophyll)濃度。 

標(biāo)本要求 

1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。


 

 160pmol/L
 
 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 80pmol/L
 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 
 40pmol/L
 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 20 pmol/L
 
 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
 
 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 
 10 pmol/L
 
 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
 
 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 
 

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   

4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

 

操作程序總結(jié):

 

  

計(jì)算 
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。

 

注意事項(xiàng)

 

 

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。 

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物請(qǐng)避光保存。

7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

 

保存條件及有效期

1.試劑盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6個(gè)月

 

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  • 小鼠酮體(KB)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)

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  • 小鼠髓樣分化蛋白-2(MD2)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)

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  • 大鼠膽酸(CA)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)

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  • 雞雌二醇(E2)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)

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  • 人乙醛脫氫酶(ALDH)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)

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  • 小鼠組織蛋白酶B(Cath-B)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

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  • 豬脂肪酶(Lipase)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

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  • 小鼠腸三葉因子(ITF)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)

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  • 人層粘連蛋白(LN)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)

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  • 人β淀粉酶(β-amylase)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

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