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首頁 > ELISA試劑盒 > 雞Elisa試劑盒>雞細胞色素P450 2H1（CYP2H1）ELISA試劑盒

雞細胞色素P450 2H1（CYP2H1）ELISA試劑盒

[商品編號]:CYP2H1

[CAS]：無

[英文名稱]：

[分子式]：

[分子量]：[品　　牌]：上海恒遠

[庫　　存]： 500 個

[數(shù)　　量]：

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產(chǎn)品描述

 【產(chǎn)品文獻支持】
影響因子(IF)=4.88；Florfenicol induces oxidative stress and hepatocyte apoptosis in broilers via Nrf2 pathway；河北農(nóng)業(yè)大學(xué)；《Ecotoxicology and Environmental Safety》

 

雞細胞色素P450 2H1（CYP2H1）ELISA試劑盒使用說明書

本試劑盒僅供研究使用。
規(guī)格： 96T/48T

試劑盒組成
1
 30倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶
7
 終止液 6ml×1瓶
2
 酶標試劑 6ml×1瓶
8
 標準品（1200U/L） 0.5ml×1瓶
3
 酶標包被板 12孔×8條
9
 標準品稀釋液 1.5ml×1瓶
4
 樣品稀釋液 6ml×1瓶
10
 說明書 1份
5
 顯色劑A液 6ml×1瓶
11
 封板膜 2張  
6
 顯色劑B液 6ml×1/瓶
12
 密封袋 1個
標本要求 
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
600U/L 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
300U/L 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
150U/L 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
75U/L 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
37.5 U/L 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
 
 
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白孔調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
操作程序總結(jié)：
 
 
計算
  以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。
注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4． 請每次測定的同時做標準曲線，最好做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6個月

 

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