微量法100管/96樣
注 意:正式測定前務(wù)必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
丙酮酸磷酸雙激酶(pyruvate phosphate dikinase, PPDK, EC 2.7.9.1)是C4途徑和景天科酸代謝途徑的限速酶,催化ATP、丙酮酸和Pi經(jīng)三步反應(yīng)生成磷酸烯醇式丙酮酸。該酶主要存在于C4植物的葉綠體基質(zhì)中,對光合功能具有重要調(diào)節(jié)作用。
測定原理:
PPDK的逆向反應(yīng)催化磷酸烯醇式丙酮酸、AMP和PPi生成丙酮酸、ATP和Pi,乳酸脫氫酶進一步催化丙酮酸和NADH生成乳酸和NAD+,在340nm測定NADH減少速率,計算PPDK活性。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
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