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人睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CNTF)ELISA試劑盒

[商品編號(hào)]:HY-10016K

[CAS]:無

[英文名稱]:Human Ciliary Neurotrophic Factor,CNTF ELISA KIT

[分子式]:

[分子量]:[品  牌]:R&D

[庫  存]: 1000 盒

[數(shù)  量]:

我要詢價(jià)

  • 產(chǎn)品名稱 規(guī)格 純度/備注 價(jià)格 庫存 訂購數(shù)量
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  • 人睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CNTF)ELISA試劑盒 48T 99.99% ¥1600 2000 立即訂購

產(chǎn)品描述

 產(chǎn)品名稱:人睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CNTF)ELISA試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
保存條件:2-8℃.
產(chǎn)品庫存:現(xiàn)貨供應(yīng)
檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本.
檢測(cè)種屬:大小鼠、人、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨elisa試劑盒等種屬
檢測(cè)方法:酶聯(lián)免疫法/酶免法(elisa)
適用范圍:僅供科研使用,不得用于臨床
供應(yīng)廠家:上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司
產(chǎn)品價(jià)格:價(jià)格優(yōu)惠,歡迎來電洽談!
ELISA試劑盒預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測(cè)定血清、血漿、組織勻漿或其它相關(guān)生物液體中目標(biāo)蛋白含量。
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理:用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或者標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過徹底洗滌后用底物顯色。底物在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品濃度呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定OD值,計(jì)算樣品濃度。

人睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CNTF)ELISA試劑盒組成:

試劑盒組成

48孔配置

96孔配置

保存

說明書

1份

1份

 

封板膜

2片(48)

2片(96)

 

密封袋

1個(gè)

1個(gè)

 

酶標(biāo)包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品

0.5ml×1瓶

0.5ml×1瓶

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1.5ml×1瓶

1.5ml×1瓶

2-8℃保存

酶標(biāo)試劑

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

樣品稀釋液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

顯色劑A液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

顯色劑B液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

終止液

3ml×1瓶

6ml×1瓶

2-8℃保存

20倍濃縮洗滌液

20ml×1瓶

30ml×1瓶

2-8℃保存

ELISA試劑盒常見系列:IL白介素系列,IFN干擾素系列、TNF腫瘤壞死因子系列、生長(zhǎng)因子系列、免疫球蛋白系列、細(xì)胞粘附分子系列、MMP系列等等。所有試劑盒經(jīng)過實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,保證有效且重復(fù)性佳。

人睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CNTF)ELISA試劑盒”操作步驟
實(shí)驗(yàn)開始前,請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?瞻卓准訕悠废♂屢100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。
注:
1. 用戶在初次使用試劑盒時(shí),應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘,以便試劑集中到管底。
2. 每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是后加底物溶液及2N H2SO4。測(cè)量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零。
3. 為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
4. 未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,請(qǐng)于2-8℃保存。標(biāo)準(zhǔn)品、生物素標(biāo)記抗體工作液、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用。請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、生物素標(biāo)記抗體工作液或、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液。
5. 建議檢測(cè)樣品時(shí)均設(shè)雙孔測(cè)定,以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制要點(diǎn)
許多試劑檢測(cè)都涉及到標(biāo)準(zhǔn)曲線的問題,標(biāo)準(zhǔn)曲線做的好與壞會(huì)直接影響到實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,甚至是關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成敗,那么究竟如何繪制或制作標(biāo)準(zhǔn)曲線呢?
首先我們需要了解下標(biāo)準(zhǔn)曲線中的問題:
標(biāo)準(zhǔn)曲線不正確
標(biāo)準(zhǔn)品凍干粉溶解體積錯(cuò)誤
確保凍干粉用正確的體積溶解,溶解體積在說明書或小瓶上標(biāo)有。
溶解時(shí)間太短
確保溶解時(shí)間足夠長(zhǎng)讓凍干粉充分溶解。
濃縮標(biāo)準(zhǔn)品稀釋錯(cuò)誤
確保濃縮標(biāo)準(zhǔn)品根據(jù)說明書要求正確稀釋。
材料/預(yù)稀釋液保存有誤
標(biāo)準(zhǔn)液和預(yù)稀釋液的保存按照說明書要求。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)不正確混勻
濃縮標(biāo)準(zhǔn)品連續(xù)稀釋并正確混勻。
檢測(cè)波長(zhǎng)錯(cuò)誤
確保檢測(cè)時(shí)光度計(jì)的波長(zhǎng)是正確的。
使用其他試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)品
只能用試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品做實(shí)驗(yàn),不能用其他試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)品替代。
其次做標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品檢測(cè)時(shí)有幾個(gè)問題需要注意
1、樣品的濃度等指標(biāo)是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出來的,所以首先要把做標(biāo)準(zhǔn)曲線看作是比做正式實(shí)驗(yàn)還要重要的一件事,否則后面的實(shí)驗(yàn)結(jié)果無從談起。
2、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品的標(biāo)準(zhǔn)濃度范圍要有一個(gè)比較大的跨度,并且要能涵蓋你所要檢測(cè)實(shí)驗(yàn)樣品的濃度,即樣品的濃度要在標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度范圍之內(nèi),包括上限和下限。而對(duì)于呈S型的標(biāo)準(zhǔn)曲線,盡量要使實(shí)驗(yàn)樣品的濃度在中間坡度陡段,即曲線幾乎成直線的范圍內(nèi)。
3、好采用倍比稀釋法配制標(biāo)準(zhǔn)曲線中的標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度,這樣就能夠保證標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度不會(huì)出現(xiàn)較大的偏離。
4、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)樣品時(shí),應(yīng)按濃度遞增順序進(jìn)行,以減少高濃度對(duì)低濃度的影響,提高準(zhǔn)確性。
5、標(biāo)準(zhǔn)曲線的樣品數(shù)一般為7個(gè)點(diǎn),但至少要保證有5個(gè)點(diǎn)。
6、做出的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)因?qū)嶒?yàn)要求不同而有所變動(dòng),但一般來說,相關(guān)系數(shù)R至少要大于0.98,對(duì)于有些實(shí)驗(yàn),至少要0.99甚至是0.999.
根據(jù)我司解決方案選擇什么方程去擬合
    用于免疫檢測(cè)的所謂“標(biāo)準(zhǔn)曲線”其實(shí)稱為擬合曲線比較合適。免疫檢測(cè)時(shí)標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)(可以是倍比稀釋的,也可以不是)濃度如果和相應(yīng)的吸光度(OD)值如果能夠呈現(xiàn)直線關(guān)系當(dāng)然是理想的了,這時(shí)可以通過EXELL等方便的獲得擬合曲線,進(jìn)而推算出樣品的濃度值。但我們做免疫檢測(cè)很少有時(shí)候能夠有這么理想的情況,標(biāo)品濃度和相應(yīng)OD值往往是"S"型的曲線關(guān)系,這時(shí)就不能用直線擬合的方式了,而對(duì)擬合方法進(jìn)行選擇就是必要的了。
關(guān)于標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合方式,直線、二次曲線、三次曲線、指數(shù)、對(duì)數(shù)等雖都可用于ELISA及其它生物學(xué)反應(yīng)中的曲線擬合,但都只適用于曲線的一部分,有的適用于前半段,有的適用于后半段,有的適用于中間一段,而Logistic曲線則對(duì)曲線的全部都有較好的適用性。當(dāng)然,如果用于定量,還是在中間一段較好。這些方法雖然沒有一種方法可以通用,但也都可以用。關(guān)鍵在于你的標(biāo)準(zhǔn)曲線做到了S形的哪一部分,你想檢測(cè)的樣品濃度在曲線的哪一部分。在S曲線的低濃度部分可以用乘冪方程很好的擬合,中低濃度部分可以用直線方程,中間部分可用對(duì)數(shù)方程,而中后段可用四參數(shù)。
    目前國(guó)際上流行的免疫檢測(cè)擬合方式是“四參數(shù)邏輯擬合”,用這種擬合方式往往能夠比較精確的反映濃度和吸光度的曲線關(guān)系,從而進(jìn)一步比較正確的獲得樣品中待測(cè)物質(zhì)的濃度值。
    其實(shí),在一個(gè)長(zhǎng)的區(qū)間內(nèi),Logistic應(yīng)該都能擬合得較為理想。但并不是說它就是萬能的。事實(shí)上不僅是ELISA,其它很多生物學(xué)反應(yīng)都是S形曲線,也都可以用Logistic曲線擬合。但建模型是一回事,而用它來定量是另一回事。如果用來定量,S形曲線的中間段(較陡處)是比較好的,而兩端的平坦部分計(jì)算誤差會(huì)大,有時(shí)甚至?xí)艽蟆?nbsp;
人睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CNTF)ELISA試劑盒”可檢測(cè)樣本:血液標(biāo)本,組織液標(biāo)本,尿液標(biāo)本,糞便標(biāo)本,腦脊液標(biāo)本,胸腹水標(biāo)本等(具體詳細(xì)情況請(qǐng)咨詢)。

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