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首頁 > ELISA試劑盒 > 人Elisa試劑盒>人免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒

人免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒

[商品編號]:HY-10156K

[CAS]:無

[英文名稱]:Human Immunoglobulin A,IgA ELISA KIT

[分子式]:

[分子量]:[品  牌]:R&D

[庫  存]: 1000 盒

[數  量]:

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  • 人免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒 96T 99.99% ¥2600 1000 立即訂購

產品描述

                                                                                                         人免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒

用途

IgA ELISA試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、緩沖液中細胞上清液及各種體液中的IgA。本試劑盒可以檢測天然和重組的IgA。本試劑盒專用于科研、而非用于臨床診斷。 

人免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒試驗原理

IgA試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知IgA濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將IgA和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中IgA的濃度呈比例關系。 

試劑盒內容及其配制

試劑盒成份(2-8℃保存)

96孔配置

48孔配置

配制

96/48人份酶標板

1塊板(96T)

半塊板(48T)

即用型

塑料膜板蓋

1

半塊

即用型

標準品:80ug/ml

1瓶(0.6ml)

1瓶(0.3ml)

按說明書進行稀稀

空白對照

1瓶(1.0ml)

1瓶(0.5ml)

即用型

標準品稀釋緩沖液

1瓶(5ml)

1瓶(2.5ml)

即用型

生物素標記的抗IgA抗體

1瓶(6ml)

1瓶(3.0ml)

即用型

親和鏈酶素-HRP

1瓶(10ml)

1瓶(5.0ml)

即用型

洗滌緩沖液

1瓶(60ml)

1瓶(30ml)

按說明書進行稀釋

底物A

1瓶(6.0ml)

1瓶(3.0ml)

即用型

底物B

1瓶(6.0ml)

1瓶(3.0ml)

即用型

終止液

1瓶(6.0ml)

1瓶(3.0ml)

即用型

自備材料

1. 蒸餾水。

2. 加樣器:5ul、10 ul、50 ul、100 ul、200、500 u、1000lul。

3. 振蕩器及磁力攪拌器等。

人免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒安全性

1. 此試劑盒的人血制品中的HbsAg、和抗HIV為陰性,但沒有實驗室可完全保證此血制品不會傳染肝炎、AIDS或其它傳染病,依據當地的安全條例處理本試劑盒里的成份及血清和血漿等樣品。

2. 避免直接接觸終止液和底物AB。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。

3. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

4. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

操作注意事項

1. 試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。

2. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。

3. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。

4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。

5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

6. 洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

7. 底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

8. 加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

9. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

樣品收集、處理及保存方法

1、 血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3、 細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4、 保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

試劑的準備

1. 標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:

80 ug/ml

(6號標準品)

原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。

40 ug/ml

(5號標準品)

100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液

20 ug/ml

(4號標準品)

100ul5號標準品加入100ul的標準品稀釋液

10 ug/ml

(3號標準品)

100ul4號標準品加入100ul的標準品稀釋液

5.0 ug/ml

(2號標準品)

100ul3號標準品加入100ul的標準品稀釋液

2.5 ug/ml

(1號標準品)

100ul2號標準品加入100ul的標準品稀釋液

0 ug/ml

(空白對照)

原始濃度不用稀釋直接加入50ul。

2. 洗滌緩沖液(20×)的稀釋:蒸餾水20倍稀釋。

操作步驟

1. 使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。

2. 根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。

3. 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。

4. 甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作四次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。

5. 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。

6. 甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作四次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。

7. 每孔加入底物A、B50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育15分鐘。避免光照。

8. 取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。

9. 450nm波長處測定各孔的OD值。

人免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒建議使用的實驗方案

 

標準品濃度(ug/ml)

 

A

80

80

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

B

40

40

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

C

20

20

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

D

10

10

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

E

5.0

5.0

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

F

2.5

2.5

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

G

0

0

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

H

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

結果分析

以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的IgA標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的IgA含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

局限

6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到精確的結果。

試劑盒性能

1. 靈敏度:小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990

2. 特異性:不與人其它細胞因子反應。

3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%

人免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒保存條件及有效期

1.試劑盒保存:;2-8。

2.有效期:6個月

 

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    文檔類型

    文件大小

  • 人免疫球蛋白-A(IgA)ELISA檢測試劑盒詳情介紹

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    70 KB

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