成牛血清使用說明
本使用說明適用于下列產(chǎn)品系列:胎牛血清(FBS) 、新生牛血清和小牛血清
牛血清介紹
動(dòng)物細(xì)胞離體培養(yǎng)需要營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基。動(dòng)物血清通常添加在合成培養(yǎng)基里用于促進(jìn)動(dòng)物細(xì)胞的正常生長(zhǎng)。血清是一種天然的促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),它含有極為豐富、并且生物利用率很高的蛋白質(zhì)、氨基酸、脂肪、生長(zhǎng)引子、維生素、激素、蛋白酶抑制因子以及各種無機(jī)微量元素。這些成分可有效地促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)。目前
普遍使用的血清種類有胎牛血清(FBS)、新生牛血清、馬血清、豬血清和人血清。根據(jù)血清應(yīng)用范圍和采集后加工方法的不同,每類動(dòng)物血清又可制備成不同的血清產(chǎn)品類型,用于各種動(dòng)物和人細(xì)胞的培養(yǎng)。然而,胎牛血清(FBS)被廣泛認(rèn)為是適于細(xì)胞培養(yǎng)的動(dòng)物血清,補(bǔ)充所必需的營(yíng)養(yǎng)成分。主要是因?yàn)镕BS富含平衡的天
然生長(zhǎng)因子和較低γ球蛋白。除此之外,F(xiàn)BS還可以防止細(xì)胞由于pH變化、重金屬離子、內(nèi)毒素和蛋白酶而引起對(duì)細(xì)胞的損害。
貯存方法
我司的血清是分裝在無菌的塑料瓶?jī)?nèi),之后冰凍保存。在運(yùn)輸過程中仍保持在冰凍狀態(tài)。如將血清存放在-10到-40oC度的在冰柜里,可連續(xù)保存數(shù)年,對(duì)血清的植板率沒有明顯的影響。血清不應(yīng)存放在無霜冰箱里。反復(fù)冰凍融化過程會(huì)使血清中的某些物質(zhì)沉淀,降低血清的使用效果。不適當(dāng)?shù)馁A存將迅速降低血清制品的有效成分和穩(wěn)定性。
牛血清解凍方法
血清從冰箱取出后應(yīng)慢慢地解凍。好在4oC低溫冰箱里放置一天或直到完全融化為止。如果時(shí)間不允許低溫解凍, 可參考以下解凍方法:
1. 將血清從冰箱里取出后,在室溫下放置15-20分鐘。
2. 然后將血清放置在37oC水浴槽里。過高溫度會(huì)導(dǎo)致血清出現(xiàn)渾濁現(xiàn)象。不要讓水淹沒裝有血清的瓶子。
3. 每隔5分鐘左右適當(dāng)搖晃瓶子,直到完全地解凍為止。
血清解凍后要立即使用。解凍的血清可以在2-8oC條件下存放達(dá)2個(gè)星期。為了避免 多次解凍/融化血清和長(zhǎng)期冷藏,我們建議將沒有用完的血清立即分裝,然后再冰凍保存,方便以后使用。
血清的熱處理
血清是動(dòng)物血液制品,它通常含有一些補(bǔ)體會(huì)誘導(dǎo)一系列的細(xì)胞降解反應(yīng)。經(jīng)熱滅活處理的血清可以減少或消除此不良影響。但不適當(dāng)?shù)臒崽幚頃?huì)導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,并時(shí)常引起血清中蛋白質(zhì)和脂類物質(zhì)在底部形成白色絮狀沉淀。在熱滅活過程中,定時(shí)適當(dāng)搖動(dòng)可以減少沉淀現(xiàn)象的發(fā)生。
我司為客戶提供熱滅活的胎牛血清。如果客戶愿意自己熱滅活各類牛血清,我們建議使用下列優(yōu)化的滅火方法:
1. 用上述描述的方法將血清在低溫冰箱或室溫下解凍。
2. 在血清解凍時(shí),將一個(gè)容器裝入適量的水,用于模擬裝有血清瓶子在熱處理過程中檢測(cè)瓶?jī)?nèi)水的溫度。容器大小、質(zhì)地和裝水的量好與裝血清的瓶子相同或相似。
3. 待血清徹底解凍時(shí),將含有血清的瓶子放在預(yù)熱的56oC水浴里,不要將含有血清的瓶子讓水淹沒或接近瓶子的蓋子,以免導(dǎo)致污染。
4. 在開始加熱處理時(shí),要及時(shí)使用溫度計(jì)測(cè)定模擬瓶?jī)?nèi)水的溫度。
5. 在預(yù)熱期間,每隔3-5分鐘要適當(dāng)搖幌含有血清和水的瓶子,確保瓶?jī)?nèi)液體 均勻加熱。
6. 一旦模擬瓶?jī)?nèi)的水溫達(dá)到55.8±0.5oC時(shí),開始計(jì)時(shí),并在此溫度范圍內(nèi)熱處理30分鐘,然后立即放在冰上冷卻。
為防止在熱處理過程中由蛋白質(zhì)變性而導(dǎo)致的渾濁和沉淀現(xiàn)象,熱處理時(shí)應(yīng)注意下列事項(xiàng):
1. 不要用高于25oC以上的溫度加快解凍速度。
2. 在熱處理之前,要使血清徹底融解。
3. 不要使熱處理的溫度高于56.3oC 。
4. 熱處理時(shí)間不要長(zhǎng)于30分鐘。
5. 在加熱過程中一定要定時(shí)搖動(dòng)血清。
成牛血清特點(diǎn)
產(chǎn)品名稱:成牛血清
產(chǎn)地:Biotopped
規(guī)格:500ml/200ml/100ml
產(chǎn)品保存/運(yùn)輸:-5°C~-20°C
產(chǎn)品有效期:兩年
Gibco bovine (aka calf serum) serum is collected from prime cattle with an age range of 12-36 months, but typically less than 24 months. All lots are processed and manufactured in New Zealand. Each lot of bovine serum is tested for its ability to support the growth of VERO cells over three subcultures. At each passage, the cells subcultured to the original cell-inoculation density. Results are compared to parallel results obtained using control growth medium containing a previously characterized reference serum.