產(chǎn)品概述
抗體類別:抗體/一抗
規(guī) 格:0.1ml/0.2ml
克 隆 性;單克隆/多克隆
抗體產(chǎn)地:國(guó)內(nèi)外多個(gè)抗體品牌
適用物種:大鼠,小鼠,雞,其他種屬
用 途:科研實(shí)驗(yàn),用于免疫組化實(shí)驗(yàn),WB實(shí)驗(yàn),相應(yīng)的標(biāo)記抗體有HRP標(biāo)記抗體,FITC標(biāo)記,BIO等。
Abcam抗體特點(diǎn):
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如何選擇 抗ABC膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體
第一步:選擇抗體。
三種二抗抗體:Whole IgG,F(ab&;rsquo;)2片段,Fab片段。
Whole IgG抗體適用于多數(shù)情況,是性價(jià)比高的。Whole IgG是完整的抗體分子,有一個(gè)Fc部分和兩個(gè)與抗原結(jié)合的Fab部分 (Figure 1, Jackson ImmunoResearch Laboratories Inc網(wǎng)站)。
F(ab&;rsquo;)2片段抗體是胃蛋白酶消化IgG除去Fc部分,剩下靠二硫鍵連接的結(jié)合抗原的兩個(gè)Fab部分。F(ab&;rsquo;)2片段抗體用在避免抗體與Protain A 或G結(jié)合,或者與有Fc受體的活細(xì)胞結(jié)合。如果一抗是完整的抗體分子,不管二抗是哪種形式都可能結(jié)合Fc受體。
Fab片段抗體是用木瓜蛋白酶消化IgG后得到的。這些抗體只含有一個(gè)Fab結(jié)合位點(diǎn)。它們用來(lái)封閉內(nèi)源性的免疫球蛋白,或者在使用相同物種來(lái)源的一抗多標(biāo)記的實(shí)驗(yàn)中封閉暴露的免疫球蛋白。
第二步:一抗的物種來(lái)源。
為了正確的選擇二抗,必須知道一抗的物種來(lái)源。如果一抗是小鼠來(lái)源的,就找&;ldquo;anti-mouse&;rdquo;。
第三步:選擇二抗的物種來(lái)源。
第四步:選擇二抗的特異性。
因?yàn)椴煌锓N來(lái)源的免疫球蛋白含有相似的結(jié)構(gòu),抗一個(gè)物種的抗體可能與其他物種發(fā)生交叉反應(yīng),除非事先特殊處理過(guò)(如標(biāo)有&;ldquo;min X Hu, Bov&;hellip;Sr Prot&;rdquo; - minimal cross-reactivity to human and bovine serum proteins) ), 經(jīng)過(guò)用圓括號(hào)中的物種 (human, bovine)的血清蛋白的吸附處理來(lái)降低交叉反應(yīng))。在選擇二抗時(shí),只有在來(lái)自兩個(gè)很相近的物種的一抗都存在而需要檢測(cè)其中一種時(shí),才使用針對(duì)其中一種特殊吸附處理過(guò)的抗體。這樣的抗體可能不能和所有亞型的IgG都很好的反應(yīng)。比如,在含有內(nèi)源性免疫球蛋白的大鼠的組織樣本中,使用針對(duì)大鼠吸附處理過(guò)的anti-mouse IgG來(lái)檢測(cè)小鼠的一抗,或者在多標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中使用了大鼠的一抗時(shí)。當(dāng)不含有大鼠免疫球蛋白時(shí),好采用沒(méi)有針對(duì)大鼠IgG處理過(guò)的anti-mouse二抗來(lái)檢測(cè)小鼠的一抗。牛血清白蛋白(BSA)和奶粉中可能含有牛IgG。直接針對(duì)牛,山羊,馬和綿羊的二抗會(huì)跟牛IgG反應(yīng)。因此,使用BSA或者奶粉來(lái)封閉或者稀釋這些抗體可能導(dǎo)致背景染色明顯增加,以及抗體效價(jià)的降低。這時(shí),推薦使用5%的二抗來(lái)源物種的正常血清來(lái)封閉。
Anti-IgG (H+L)這類抗體和IgG分子的重鏈和輕鏈[比如Fc和F(ab&;rsquo;)2/Fab部分]都可以反應(yīng)。也可以和其他的免疫球蛋白家族(比如IgM和IgA)反應(yīng),因?yàn)樗械拿庖咔虻鞍锥加邢嗤妮p鏈(&;kappa;鏈或者&;lambda;鏈)。Anti-IgG (H+L) 比只抗片段的抗體識(shí)別更多的抗原表位。
Anti-IgG,Fc fragment specific這類抗體和IgG重鏈的Fc部分反應(yīng)。它們通過(guò)了ELISA檢測(cè),和(或)針對(duì)Fab片段吸附的測(cè)試。某些情況下,需要額外檢測(cè)和處理來(lái)降低和IgM或IgA的交叉反應(yīng),會(huì)被描述為&;ldquo;Anti-IgG, Fc&;gamma;fragment specific&;rdquo;。注意:不是所有anti-IgG, Fc抗體和所有亞型的IgG反應(yīng)能力一致。要找和四種IgG亞類反應(yīng)能力差不多的anti-mouse IgG, Fc&;gamma;抗體的話,應(yīng)當(dāng)選Goat Anti-Mouse IgG (subclasses 1+2a+2b+3), Fc&;gamma;fragment specific (min X Hu,Bov,Rb Sr Prot)。
Anti-IgG,Fc&;gamma; Subclass specific抗體分別和不同的小鼠IgG亞型重鏈的Fc部分反應(yīng)。這類抗體經(jīng)過(guò)ELISA和/或針對(duì)Fab片段、IgM和其他小鼠IgG亞型的吸附測(cè)試。
Anti-IgG,F(ab&;rsquo;)2 fragment specific和IgG的F(ab&;rsquo;)2/Fab部分反應(yīng)。這類抗體經(jīng)過(guò)了ELISA和/或Fc片段的吸附檢測(cè)。因?yàn)楹洼p鏈反應(yīng),它們同時(shí)也和具有相同輕鏈的其他種類的免疫球蛋白反應(yīng)(如IgM和IgA)。
(min X&;hellip;Sr Prot)這類抗體經(jīng)過(guò)了檢測(cè),以及針對(duì)IgG和圓括號(hào)中的物種的血清蛋白的吸附處理。當(dāng)其他物種免疫球蛋白的出現(xiàn)可能導(dǎo)致交叉反應(yīng)時(shí),推薦使用這類抗體。但是,當(dāng)要選擇經(jīng)過(guò)針對(duì)相近物種吸附處理的抗體時(shí),要特別注意,因?yàn)樗鼈兡茏R(shí)別的表位數(shù)量大大減小了,可能識(shí)別單抗的能力很弱。這種情況的例子有Anti-Mouse IgG (min X Rat,&;hellip;.Sr Prot), Anti-Rat IgG (min X Mouse, &;hellip;Sr Prot),和 Anti-Ramenian Hamster IgG (min X Mouse, Rat, &;hellip;Sr Prot)。
ML (Multiple Labeling多標(biāo)記實(shí)驗(yàn)): 有些抗體標(biāo)明了ML,來(lái)強(qiáng)調(diào)它們除了可以用于單標(biāo),還可用于多標(biāo)記實(shí)驗(yàn)。
第五步:選擇需要的探針。
第六步:選擇的抗體的規(guī)格、價(jià)錢和目錄號(hào)。
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