[商品編號(hào)]:HY-16004K
[CAS]:無(wú)
[英文名稱]:Nude Mouse Protein Phosphatase,PP ELISA KIT
[分子式]:
[分子量]:[品 牌]:R&D
[庫(kù) 存]: 1000 盒
裸鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒 僅供研究使用。
檢測(cè)范圍:96T/48T
使用目的:
本試劑盒用于測(cè)定動(dòng)物種屬血清、血漿及相關(guān)液體樣本中含量。
實(shí)驗(yàn)原理
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或者標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后用底物顯色。底物在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品濃度呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定OD值,計(jì)算樣品濃度。
試劑盒組成
1 | 30倍濃縮洗滌液 | 20ml×1瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品(80ng/L) | 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12孔×8條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1瓶 | 10 | 說(shuō)明書 | 1份 |
5 | 顯色劑A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2張 |
6 | 顯色劑B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1個(gè) |
標(biāo)本要求
·客戶需提供待檢測(cè)抗體和包被用抗原。
·檢測(cè)的樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清、人和動(dòng)物的血清、血漿。
·樣本收集后應(yīng)立即-20℃保存,若長(zhǎng)期保存應(yīng)-70℃。
·樣本量的要求:若一個(gè)指標(biāo)做復(fù)孔檢測(cè)應(yīng)不少于250ul,做單孔檢測(cè)應(yīng)不少于120ul。建議若客戶樣本量充足好提供500ul以上。
·客戶的樣本收集后,立即按要求保存,切忌反復(fù)凍融。外地客戶郵寄需要用干冰運(yùn)輸。郵寄前請(qǐng)與技術(shù)支持溝通確認(rèn)。
裸鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒 操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
40 ng/L | 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
20 ng/L | 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
10 ng/L | 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
5 ng/L | 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
2.5 ng/L | 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
操作程序總結(jié):
計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
裸鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒代測(cè)周期等內(nèi)容
服務(wù)編號(hào) 服務(wù)項(xiàng)目 內(nèi)容說(shuō)明 提交結(jié)果 周期
RGSc1 間接法ELISA檢測(cè) 客戶提供檢測(cè)材料 檢測(cè)試驗(yàn)報(bào)告 1周
RGSc2 夾心法ELISA檢測(cè) 客戶提供檢測(cè)材料 檢測(cè)試驗(yàn)報(bào)告 1周
和檢測(cè)試劑盒
RGSc3 競(jìng)爭(zhēng)法ELISA檢測(cè) 客戶提供檢測(cè)材料 檢測(cè)試驗(yàn)報(bào)告 2周
和檢測(cè)試劑盒
注意事項(xiàng)
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請(qǐng)避光保存。
7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10. 如與英文說(shuō)明書有異,以英文說(shuō)明書為準(zhǔn)。
裸鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒保存條件
1)未開封的試劑盒:所有試劑均按試劑瓶標(biāo)簽上所示保存。請(qǐng)注意,收到試劑盒后請(qǐng)盡快將標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A、檢測(cè)溶液B以及96孔板保存于-20℃。
2)使用后的試劑盒:剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存,開封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免潮濕。
溫馨提示:試劑盒內(nèi)酶標(biāo)條可拆卸,按實(shí)驗(yàn)需求可分多次使用;使用后的剩余試劑盒建議在首次實(shí)驗(yàn)后1個(gè)月內(nèi)使用完畢。產(chǎn)品過(guò)期時(shí)間以盒子上的標(biāo)簽為準(zhǔn),保質(zhì)期內(nèi)所有組分都確保是穩(wěn)定的。
售后服務(wù)問(wèn)題:
1.有質(zhì)量問(wèn)題免費(fèi)包換,合同上注明了的.(質(zhì)量問(wèn)題包括運(yùn)輸不當(dāng),客戶在使用過(guò)程中測(cè)不出結(jié)果,等等!)
2.全程技術(shù)指導(dǎo)。(包括售前的標(biāo)本收集,使用過(guò)程中不明白的地方,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后的數(shù)據(jù)分析,有任何疑問(wèn),我們技術(shù)都會(huì)即時(shí)給您去電)
3.提供免費(fèi)代測(cè)的服務(wù)。(您只需把標(biāo)本寄過(guò)來(lái),我們?yōu)槟?jié)省時(shí)間,幫您出結(jié)果,原始數(shù)據(jù),分析數(shù)據(jù)均可提供,一般時(shí)間是5天左右)
4.客戶有任何問(wèn)題,我們都是在一個(gè)工作日之內(nèi)給出解決方案。售后和技術(shù)這一塊都是竭誠(chéng)為客戶服務(wù).
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