一、詳細介紹：

【產(chǎn)品名稱】：大鼠胰島素原（PI）ELISA試劑盒
【產(chǎn)品用途】：被測樣品定性定量分析
【產(chǎn)品規(guī)格】：96T/48T(兩種規(guī)格)
【檢測方法】：酶免法/酶聯(lián)免疫法(ELISA)
【保存條件】：2-8℃
【供 貨 期】：1-3天(現(xiàn)貨供應)
【產(chǎn)品性狀】：液體盒裝
【產(chǎn)品價格】：(含稅含運費，我們?nèi)�程提供ELISA實驗技術指導和ELISA試劑盒免費代測)
【銷售優(yōu)勢】：價格行業(yè)優(yōu)勢、質量可靠、如果出現(xiàn)客觀質量問題包換退
【待檢樣本】：體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等
【產(chǎn)品保質期】：半年(六個月)
二、選擇及服務

我們可以根據(jù)您的應用需要，比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求，而量身定制檢測試劑盒，有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。

◎應盡量選擇正規(guī)廠家，產(chǎn)品經(jīng)相應政府部門審核認可，試劑應從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟性全面評價。

◎靈敏度：有二層含義，1）為試劑檢出被檢物質的低量的能力；2）為試劑對大量樣品中陽性檢出的能力。

◎特異性：常用交叉反應率表示。含有與待測物相近結構部份的物質可能存在交叉反應，使測定結果升高，可能導致假陽性，所以交叉反應是評價其質量的關鍵指標。

◎精密度：ELISA試劑一般指其批內(nèi)CV%，其值應小于15%；定量試劑應同時考察線性范圍。

◎準確度：通過添加回收實驗進行評價。

◎簡便性：指在不影響試劑的前三項指標的前題下，實驗和測定步驟越少越好，在定性實驗中結果判斷簡單明了，定量試驗結果計算也應簡單。

◎安全性：指試劑對操作者和環(huán)境安全無害無傳染性。

◎經(jīng)濟性：試劑在同等質量條件下通過大規(guī)模生產(chǎn)或技術進步降低成本，而市場價格比較合理。

◎試劑評價：需要有權威的確證方法和確證的樣品進行檢測。

三、檢測概述
大鼠胰島素原（PI）ELISA試劑盒（酶聯(lián)接免疫吸附反應分析）是以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的實驗技術。 由于抗原、抗體的反應在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應物，從而保證試驗結果的特異性與穩(wěn)定性。

實際應用中，通過不同的設計，具體的方法步驟可有多種。即：用于檢測抗體的間接法、用于檢測抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。目前我們對客戶提供比較常用的ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法服務。
四、技術流程
雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育1小時。然后洗滌(同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
5、終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。
間接法(檢測未知抗體)
1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml， 每孔加0.1ml，4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標抗體：于反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
5、終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。
五、樣本前處理注意事項

1 均質

組織樣本:肉、肝食品類切細，用絞肉機反復絞碎，混合均勻。

水產(chǎn)樣本：去除樣品的非食用部分，食用部分切細，用均質器均漿；原料表面較臟時,需適當用蒸餾水清洗。

蛋類：鮮蛋去殼，蛋黃和蛋白充分混勻。

水果、蔬菜類：先用水洗去泥沙，然后除去表面的水分，取食用部分。

2 振蕩提取

 將提取溶劑加入到裝有樣品的具塞容器中，振蕩，使提取溶劑與容器內(nèi)的樣品充分接觸以深入到樣本組織內(nèi)部，提取待測組分。

2.1振蕩方式：振蕩器上進行上下、往返式振蕩、手搖式上下振蕩。

2.2 在組織樣本中加入有機溶劑之間提取時，應邊加邊振蕩，防止組織凝結成團，不利于提取。

3. 在用有機溶劑提取過程中，如果出現(xiàn)乳化現(xiàn)象，解決的方法有：①用細頭輕輕的攪拌，破壞乳化后，再重復離心。②再加入適量的提取劑，重新振蕩。注意離心后要保證樣本的稀釋倍數(shù)不變。

4 濃縮

 由于凈化過程中引入的溶劑，可能會降低待測組分的濃度或者不適宜直接分析，需要去除全部有機溶劑。即試劑盒前處理步驟中把樣本在60℃氮氣下吹干，再用復溶液溶解干燥殘留物。

濃縮方式：

 氮氣吹干除雜、壓縮空氣吹干除雜。

注意：

1在吹干樣本之前，用甲醇清洗針頭，防止雜質干擾。

2在吹樣本時，針頭應在液面上空，避免與樣本接觸，防止產(chǎn)生交叉污染。

3樣本吹干后應立即取下，避免吹的時間過長，影響終檢測結果。

4不同的藥物，吹干后樣本的保質期不同，提倡待樣本回到室溫后立即復溶。

5 凈化

 經(jīng)過提取的待測組分中通常含有一些會干擾試劑盒中抗原抗體反應的雜質或者是含有與待測物結構相似的雜質。將待測組分與雜質分離的過程，我們稱為試劑盒中樣本的凈化。在我們現(xiàn)有的試劑盒前處理方法中涉及到的常見的凈化是：液液分配法。

 比如：用復溶液溶解干燥殘留物之前先加入適量的正己烷，在加入正己烷和復溶液渦動后如果出現(xiàn)乳化現(xiàn)象，可以60℃水浴加熱，至乳化現(xiàn)象消失或減弱后，加大離心轉速進行離心。

六、報告內(nèi)容及標準
1、大鼠胰島素原（PI）ELISA試劑盒標準曲線；
2、詳細的實驗步驟；
3、完整的實驗報告（試劑耗材，實驗方法，實驗結果及結果說明）；
4、實驗進行階段，我公司客服人員會及時向您匯報實驗進程。
七、訂購說明：

1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨，一般情況下都能訂貨當日發(fā)貨。 

2、部分非常用產(chǎn)品，需提前1－2日預訂，海外期貨則需要提前3-6周預訂。 

3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化，若有變動以訂貨當日新價格為準。 

4、每日訂單截止時間為16點整，部分城市可到17點整，因超過截止時間造成當日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。

5、請辦理完貨款后，將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、電話等以傳真、EMail、短信、電話等形式通知我們。