本試劑盒僅供研究使用。

【產(chǎn)品名稱】：人蛋白二硫化物異構(gòu)酶A3(PDIA3)ELISA試劑盒

【檢測(cè)方法】：酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)

【產(chǎn)品性狀】：96T/48T，盒裝液體

【貯    藏】：2-8°C

【有 效 期】：Elisa試劑盒二年，我公司Elisa試劑盒均為新批次，可放心購(gòu)買。

【主要成分】：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。

【標(biāo)    本】：血清/血漿/細(xì)胞培養(yǎng)上清液/組織勻漿/組織液/尿液/分泌物

【質(zhì)量承諾】：我們堅(jiān)持對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量作不斷的評(píng)估、創(chuàng)新和改善以確保您對(duì)我們產(chǎn)品的高度信任。

【待檢樣本】：體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等

【樣品采集】：Elisa試劑盒收集標(biāo)本前必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本，儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆�，如有特殊原因需要周期收集�?biāo)本，將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí)，-20℃可保存1個(gè)月。-70℃可保存6個(gè)月。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。

使用目的
本試劑盒用于測(cè)定猴血清、血漿及相關(guān)液體樣本中粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)含量。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中猴粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)水平。用純化的猴粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)，再與HRP 標(biāo)記的粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中猴粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)濃度。
試劑盒組成
1 30 倍濃縮洗滌液20ml×1 瓶7 終止液6ml×1 瓶
2 酶標(biāo)試劑6ml×1 瓶8 標(biāo)準(zhǔn)品（2000ng/L） 0.5ml×1 瓶
3 酶標(biāo)包被板12 孔×8 條9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1 瓶
4 樣品稀釋液6ml×1 瓶10 說明書1 份
5 顯色劑A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 張
6 顯色劑B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 個(gè)

操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
1000ng/L 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
500ng/L 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl 的5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
250ng/L 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl 的4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
125ng/L 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl 的3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
62.5ng/L 1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl 的2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品終稀釋度為5 倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液：將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒后棄去，如此重復(fù)5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值）。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

代測(cè)范圍 
1、本公司網(wǎng)站公布的試劑盒，可以提供代測(cè)服務(wù)。 
2、本公司網(wǎng)站上尚未列出的試劑盒，可以代為研發(fā)和測(cè)定，費(fèi)用等相關(guān)信息電話咨詢。

公司責(zé)任 
1、對(duì)于客戶提供的樣品和要測(cè)定的指標(biāo)，及時(shí)提供規(guī)范的檢測(cè)報(bào)告，確保數(shù)據(jù)真實(shí)可靠。未經(jīng)客戶允許，不得相關(guān)信息透露給第三方。

2、對(duì)于公司網(wǎng)站上列出的試劑盒測(cè)定指標(biāo)，我們將在收到樣品之日起13個(gè)工作日內(nèi)提供規(guī)范的檢測(cè)報(bào)告；反之，提供檢測(cè)報(bào)告的時(shí)間由雙方協(xié)商決定。

3、本公司的人蛋白二硫化物異構(gòu)酶A3(PDIA3)ELISA試劑盒檢測(cè)報(bào)告僅對(duì)收到的樣品負(fù)責(zé)。為了確保測(cè)定結(jié)果有效，請(qǐng)客戶在送檢前與本公司客服人員溝通，并且按照要求做好樣品的數(shù)量、標(biāo)簽和寄送等相關(guān)事宜。

4、客戶如果對(duì)測(cè)定結(jié)果不滿意，務(wù)必在收到檢測(cè)報(bào)告之日起起5個(gè)工作日內(nèi)與本公司客服人員聯(lián)系，商定解決辦法。

5、在收到客戶檢測(cè)費(fèi)起5個(gè)工作日內(nèi)快遞寄送加蓋公章的紙質(zhì)檢測(cè)報(bào)告和發(fā)票。

客戶責(zé)任
1、提供樣品的性質(zhì)（物種和組織等）和處理狀況（有無特殊的化學(xué)處理等），確保樣品數(shù)量和標(biāo)簽無誤，以符合要求的方式進(jìn)行包裝和寄送（注意加足夠的冰袋冷藏，特別嬌貴的樣品請(qǐng)用干冰）。

2、及時(shí)付款。一般在寄送樣品時(shí)付費(fèi)用的70%，收到電子版檢測(cè)報(bào)告，確認(rèn)無誤后付剩下的30%。如有特殊情況需雙方協(xié)商決定。

3、以上單個(gè)樣品測(cè)定價(jià)格包括預(yù)測(cè)費(fèi)用、試劑費(fèi)用、人工費(fèi)用和數(shù)據(jù)處理費(fèi)用以及蛋白質(zhì)含量測(cè)定費(fèi)用。由于統(tǒng)計(jì)處理需要，一般處理每個(gè)樣品應(yīng)該至少測(cè)定三次（強(qiáng)烈建議）。如果樣品中已經(jīng)包括三次或三次以上重復(fù)，或者用戶不需要重復(fù)測(cè)定，請(qǐng)用戶聲明。如果測(cè)定樣品數(shù)量很多，可以在測(cè)定的總費(fèi)用上進(jìn)行適當(dāng)?shù)臏p免

代測(cè)的優(yōu)勢(shì)
1、將要測(cè)定的樣品都是有研發(fā)該試劑盒的專家全權(quán)負(fù)責(zé)的，因此可以確保測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。

2、節(jié)省客戶的寶貴時(shí)間和精力。
3、交給我們代測(cè)，您可以不必為操作經(jīng)驗(yàn)的不成熟和儀器的缺乏而苦惱。 
附加免費(fèi)服務(wù)
1、根據(jù)客戶研究目的，免費(fèi)提供專業(yè)的檢測(cè)意見和建議。 
2、免費(fèi)提供樣品蛋白質(zhì)含量測(cè)定。 
3、免費(fèi)提供測(cè)定結(jié)果分析，包括顯著性差異、指標(biāo)變化的生理生化意義和相關(guān)指標(biāo)變化之間的關(guān)系等。

注意事項(xiàng)

一、服務(wù)承諾：

凡購(gòu)買本公司目錄任何一種酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒，您只需將需要檢測(cè)的動(dòng)物（Human, Rat, Mouse, Rabbit, Monkey, Pig……）種類和檢測(cè)指標(biāo)（白介素類、激素類）及標(biāo)本數(shù)量（48T/96T）通知公司業(yè)務(wù)員即可。在接到客戶標(biāo)本當(dāng)日起，現(xiàn)貨產(chǎn)品二周內(nèi)將檢測(cè)報(bào)告交到客戶手中！
歡迎臨床醫(yī)學(xué)界和各科研單位在各種項(xiàng)目上與我們公司開展不同層次的密切合作，以雙贏求發(fā)展，共同進(jìn)步，為中國(guó)檢測(cè)事業(yè)的發(fā)展積累經(jīng)驗(yàn)。

二、樣本要求

在收集標(biāo)本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃，必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。我們提倡新鮮標(biāo)本盡早檢測(cè)，對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本，及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆茫�如有特殊原因需要周期收集�?biāo)本，請(qǐng)?jiān)炷Ｈ〔暮螅瑢��?biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。因冰室與室溫存在一定溫差，蛋白極易降解，直接影響實(shí)驗(yàn)質(zhì)量，所以避免反復(fù)凍融。代測(cè)放免標(biāo)本的客戶取材前須向我司銷售人員索要說明書，具體操作注意事項(xiàng)請(qǐng)與我司技術(shù)人員溝通。

液體類標(biāo)本：標(biāo)本必須為液體，不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。

血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

血漿：應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，加入10%（v/v）抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1%heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

尿液、胸腹水、腦脊液：用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.0-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin（抑肽酶）。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清置于-20度或-70度保存，如有必要，可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

三、寄人蛋白二硫化物異構(gòu)酶A3(PDIA3)ELISA試劑盒標(biāo)本時(shí)需注明以下情況：

1、標(biāo)本編號(hào)；2、所測(cè)項(xiàng)目；3、是否做復(fù)孔；3、聯(lián)系方式；4、實(shí)驗(yàn)后標(biāo)本是否寄回。

客戶須知：

客戶應(yīng)對(duì)所提供的材料及信息負(fù)責(zé)，如因客戶提供的材料及信息不準(zhǔn)確而引起的實(shí)驗(yàn)延誤或經(jīng)濟(jì)損失由客戶承擔(dān)。

保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6 個(gè)月