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首頁 > 原裝ELISA試劑盒 > Human Elisa kit>人抑肽酶(AP)ELISA試劑盒

人抑肽酶(AP)ELISA試劑盒

[商品編號(hào)]:HY-11274K

[CAS]:無

[英文名稱]:Human Aprotinin,AP ELISA KIT

[分子式]:

[分子量]:[品  牌]:R&D

[庫  存]: 100 盒

[數(shù)  量]:

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  • 產(chǎn)品名稱 規(guī)格 純度/備注 價(jià)格 庫存 訂購(gòu)數(shù)量
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產(chǎn)品描述

 性能參數(shù)
【產(chǎn)品名稱】:人抑肽酶(AP)ELISA試劑盒

【產(chǎn)品用途】:被測(cè)樣品定性定量分析

【產(chǎn)品規(guī)格】:96T/48T(兩種規(guī)格)

【檢測(cè)方法】:酶免法/酶聯(lián)免疫法(ELISA)

【保存條件】:2-8℃

【供 貨 期】:1-3天(現(xiàn)貨供應(yīng))

【產(chǎn)品性狀】:液體盒裝

【產(chǎn)品價(jià)格】:(ELISA試劑盒含稅含運(yùn)費(fèi),我們?nèi)烫峁〦LISA實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)和ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè))

【銷售優(yōu)勢(shì)】:價(jià)格行業(yè)優(yōu)勢(shì)、質(zhì)量可靠、如果出現(xiàn)客觀質(zhì)量問題包換退

【待檢樣本】:體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等

【產(chǎn)品保質(zhì)期】:半年(六個(gè)月)

使用前徹底閱讀說明書。本酶聯(lián)免疫試劑盒是基于經(jīng)典酶聯(lián)夾心技術(shù)原理,只能用于研究用途,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。

ELISA試劑盒原理
ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。

ELISA試劑盒類型
ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。在這種測(cè)定方法中有三個(gè)必要的試劑:(1)固相的抗菌素原或抗體,即"免疫吸附劑"(immunosorbent);(2)酶標(biāo)記的抗原或抗體,稱為"結(jié)合物"(conjugate);(3)酶反應(yīng)的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的情況以及檢測(cè)的具體條件,可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測(cè)方法。用于臨床檢驗(yàn)的ELISA主要有以下幾種類型:

人抑肽酶(AP)ELISA試劑盒雙抗體夾心法測(cè)抗原

 

  雙抗體夾心法是檢測(cè)抗原常用的方法,操作步驟如下:
1) 將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。
2) 加受檢標(biāo)本,保溫反應(yīng)。標(biāo)本中的抗原與固相抗體結(jié)合,形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。
3) 加酶標(biāo)抗體,保溫反應(yīng)。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。徹底洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時(shí)固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢抗原的量相關(guān)。
4) 加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。通過比色,測(cè)知標(biāo)本中抗原的量。在臨床檢驗(yàn)中,此法適用于檢驗(yàn)各種蛋白質(zhì)等大分子抗原,例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要獲得針對(duì)受檢抗原的異性抗體,就可用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物而建立此法。如抗體的來源為抗血清,包被和酶標(biāo)用的抗體好分別取自不同種屬的動(dòng)物。如應(yīng)用單克隆抗體,一般選擇兩個(gè)針對(duì)抗原上不同決定簇的單抗,分別用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物。這種雙位點(diǎn)夾心法具有很高的特異性,而且可以將受檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗體一起保溫反應(yīng),作一步檢測(cè)。
在一步法測(cè)定中,當(dāng)標(biāo)本中受檢抗原的含量很高時(shí),過量抗原分別和固相抗體及酶標(biāo)抗體結(jié)合,而不再形成"夾心復(fù)合物"。類同于沉淀反應(yīng)中抗原過剩的后帶現(xiàn)象,此時(shí)反應(yīng)后顯色的吸光值(位于抗原過剩帶上)與標(biāo)準(zhǔn)曲線(位于抗體過剩帶上)某一抗原濃度的吸光值相同(參見1.3.2,圖1-4),如按常法測(cè)讀,所得結(jié)果將低于實(shí)際的含量,這種現(xiàn)象被稱為鉤狀效應(yīng)(hook effect),因?yàn)闃?biāo)準(zhǔn)曲線到達(dá)高峰后呈鉤狀彎落。鉤狀效應(yīng)嚴(yán)重時(shí),反應(yīng)甚至可不顯色而出現(xiàn)假陰性結(jié)果。因此在使用一步法試劑測(cè)定標(biāo)本中含量可異常增高的物質(zhì)(例如血清中HBsAg、AFP和尿液hCG等)時(shí),應(yīng)注意可測(cè)范圍的高值。用高親和力的單克隆抗體制備此類試劑可削弱鉤狀效應(yīng)。
假使在被測(cè)分子的不同位點(diǎn)上含有多個(gè)相同的決定簇,例如HBsAg的a決定簇,也可用針對(duì)此決定的同一單抗分別包被固相和制備酶結(jié)合物。但在HBsAg的檢測(cè)中應(yīng)注意亞型問題,HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4個(gè)亞型,雖然每種亞型均有相同的a決定簇的反應(yīng)性,這也是用單抗作夾心法應(yīng)注意的問題。
雙抗體夾心法測(cè)抗原的另一注意點(diǎn)是類風(fēng)濕因子(RF)的干擾。RF是一種自身抗體,多為IgM型,能和多種動(dòng)物IgG的Fc段結(jié)合。用作雙抗體夾心法檢測(cè)的血清標(biāo)本中如含有RF,它可充當(dāng)抗原成份,同時(shí)與固相抗體和酶標(biāo)抗體結(jié)合,表現(xiàn)出假陽性反應(yīng)。采用F(ab')或Fab片段作酶結(jié)合物的試劑,由于去除了Fc段,從而消除RF的干擾。雙抗體夾心法ELISA試劑是否受RF的影響,已被列為這類試劑的一項(xiàng)考核指標(biāo)。
雙抗體夾心法適用于測(cè)定二價(jià)或二價(jià)以上的大分子抗原,但不適用于測(cè)定半抗原及小分子單價(jià)抗原,因其不能形成兩位點(diǎn)夾心。

ELISA試劑盒操作程序

1. 確定本次檢測(cè)所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目。
2. 將倍比稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品各0.1ml依次加入一排7孔中,1孔只加樣品稀釋液的作為對(duì)照。處理后的標(biāo)本按100ul每孔加入。
3. 酶標(biāo)板加上蓋,37℃反應(yīng)90分鐘。
4. 反應(yīng)后用自動(dòng)洗板機(jī)吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體;或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體,再對(duì)著吸水紙拍幾下。洗滌2次。
5. 將準(zhǔn)備好的生物素抗體工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反應(yīng)60分鐘。
6. 0.01M TBS或0.01M PBS洗滌3次,每次浸泡1分鐘左右。
7. 將準(zhǔn)備好的ABC工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反應(yīng)30分鐘。
8. 0.01M TBS或0.01M PBS洗滌5次,每次浸泡1-2分鐘左右。
9. 按每孔0.1ml依次加入TMB顯色工作液,37℃避光反應(yīng),反應(yīng)過程中,要經(jīng)常的觀察,當(dāng)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔差別不明顯時(shí),即可加入TMB終止液0.1ml/孔。(顯色反應(yīng)長(zhǎng)不要超過30分鐘)。
10. 用酶標(biāo)儀在450nm測(cè)定O.D.值。
11. 根據(jù)樣品的吸光值在坐標(biāo)上找出對(duì)應(yīng)的濃度。用戶也可以使用各種應(yīng)用軟件來計(jì)算。應(yīng)記住由于樣品稀釋了N倍,其實(shí)際濃度應(yīng)該×N。

質(zhì)量保證與免責(zé)聲明

1、我們保證向用戶提供完全合格的產(chǎn)品。如您認(rèn)為產(chǎn)品確實(shí)存在質(zhì)量問題,請(qǐng)?jiān)谑?到產(chǎn)品21天內(nèi)并且產(chǎn)品使用量沒有超過一半前以書面方式提出,否則將不予受理或賠償。同時(shí)產(chǎn)品賠償只限于產(chǎn)品價(jià)值本身,不涉及其他任何損失。如果您的樣品 非常珍貴,請(qǐng)務(wù)必先使用適當(dāng)?shù)年栃詫?duì)照進(jìn)行檢測(cè),在檢測(cè)體系建立起來以后,再檢測(cè)您非常珍貴的樣品。

2、若因用戶貯存或使用不當(dāng)所引起的質(zhì)量投訴,我們不予承擔(dān)責(zé)任。除質(zhì)量原因外的其它任何問題,例如缺乏使用某種試劑盒所需的儀器,訂購(gòu)錯(cuò)了試劑盒等,我們不承擔(dān)任何責(zé)任,也不接受非質(zhì)量原因引起的客戶投訴。

3、如發(fā)現(xiàn)產(chǎn)品有任何缺漏或破損,請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品后2個(gè)工作日內(nèi)通知我們。

4、我們提供的所有產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究使用,不得用于臨床診斷或治療,不得存放于普通住宅內(nèi)。如有單位或個(gè)人擅自改變我們產(chǎn)品的用途,或存放于不適當(dāng)?shù)牡胤,我們不承?dān)任何責(zé)任。

ELISA試劑盒發(fā)貨                 

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ELISA試劑盒發(fā)票 

1.本公司一律開具正規(guī)發(fā)票,上海市國(guó)家稅務(wù)局通用機(jī)打發(fā)票。 

2.開票的客戶,請(qǐng)?zhí)峁┛蛻艄久Q。 

ELISA試劑盒庫存數(shù)量 

    因?yàn)楸镜甑拿咳瞻l(fā)貨量很大,庫存會(huì)動(dòng)態(tài)變化,訂貨前請(qǐng)與客服確認(rèn)是否有庫存,以免影響到您的工作進(jìn)展。 

人抑肽酶(AP)ELISA試劑盒關(guān)于離江浙滬較遠(yuǎn)的省份的冷藏貨品的發(fā)貨 

    因?yàn)楸竟旧虾TO(shè)有倉庫,如果發(fā)冷藏貨品到離江浙滬較遠(yuǎn)的省份、地方,時(shí)間可能較長(zhǎng),遇到周末則冰袋、干冰可能耗盡,進(jìn)而影響到貨品的功能。所以,周一、周二我們將直接發(fā)貨。逢周三、周四、周五,請(qǐng)與客服人員溝通,以確定您是否能在周末收貨。如果您要貨比較急,且確認(rèn)可以在周末收貨(請(qǐng)一定要留下您的手機(jī)號(hào)),我們將為您發(fā)貨;如果您周末不能收貨,我們將安排在下一周的周一為您發(fā)貨。

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