性能參數(shù)
【產(chǎn)品名稱】:人碳酸酐酶2(CA-2)ELISA試劑盒
【產(chǎn)品用途】:被測樣品定性定量分析
【產(chǎn)品規(guī)格】:96T/48T(兩種規(guī)格)
【檢測方法】:酶免法/酶聯(lián)免疫法(ELISA)
【保存條件】:2-8℃
【供 貨 期】:1-3天(現(xiàn)貨供應(yīng))
【產(chǎn)品性狀】:液體盒裝
【產(chǎn)品價格】:(ELISA試劑盒含稅含運費,我們?nèi)烫峁〦LISA實驗技術(shù)指導(dǎo)和ELISA試劑盒免費代測)
【銷售優(yōu)勢】:價格行業(yè)優(yōu)勢、質(zhì)量可靠、如果出現(xiàn)客觀質(zhì)量問題包換退
【待檢樣本】:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等
【產(chǎn)品保質(zhì)期】:半年(六個月)
使用前徹底閱讀說明書。本酶聯(lián)免疫試劑盒是基于經(jīng)典酶聯(lián)夾心技術(shù)原理,只能用于研究用途,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。
ELISA試劑盒原理
ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達到很高的敏感度。
ELISA試劑盒類型
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有三個必要的試劑:(1)固相的抗菌素原或抗體,即"免疫吸附劑"(immunosorbent);(2)酶標記的抗原或抗體,稱為"結(jié)合物"(conjugate);(3)酶反應(yīng)的底物。根據(jù)試劑的來源和標本的情況以及檢測的具體條件,可設(shè)計出各種不同類型的檢測方法。用于臨床檢驗的ELISA主要有以下幾種類型:
雙抗體夾心法測抗原
雙抗體夾心法是檢測抗原常用的方法,操作步驟如下:
1) 將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。
2) 加受檢標本,保溫反應(yīng)。標本中的抗原與固相抗體結(jié)合,形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。
3) 加酶標抗體,保溫反應(yīng)。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標抗體結(jié)合。徹底洗滌未結(jié)合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢抗原的量相關(guān)。
4) 加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。通過比色,測知標本中抗原的量。在臨床檢驗中,此法適用于檢驗各種蛋白質(zhì)等大分子抗原,例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要獲得針對受檢抗原的異性抗體,就可用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物而建立此法。如抗體的來源為抗血清,包被和酶標用的抗體好分別取自不同種屬的動物。如應(yīng)用單克隆抗體,一般選擇兩個針對抗原上不同決定簇的單抗,分別用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物。這種雙位點夾心法具有很高的特異性,而且可以將受檢標本和酶標抗體一起保溫反應(yīng),作一步檢測。
在一步法測定中,當標本中受檢抗原的含量很高時,過量抗原分別和固相抗體及酶標抗體結(jié)合,而不再形成"夾心復(fù)合物"。類同于沉淀反應(yīng)中抗原過剩的后帶現(xiàn)象,此時反應(yīng)后顯色的吸光值(位于抗原過剩帶上)與標準曲線(位于抗體過剩帶上)某一抗原濃度的吸光值相同(參見1.3.2,圖1-4),如按常法測讀,所得結(jié)果將低于實際的含量,這種現(xiàn)象被稱為鉤狀效應(yīng)(hook effect),因為標準曲線到達高峰后呈鉤狀彎落。鉤狀效應(yīng)嚴重時,反應(yīng)甚至可不顯色而出現(xiàn)假陰性結(jié)果。因此在使用一步法試劑測定標本中含量可異常增高的物質(zhì)(例如血清中HBsAg、AFP和尿液hCG等)時,應(yīng)注意可測范圍的高值。用高親和力的單克隆抗體制備此類試劑可削弱鉤狀效應(yīng)。
假使在被測分子的不同位點上含有多個相同的決定簇,例如HBsAg的a決定簇,也可用針對此決定的同一單抗分別包被固相和制備酶結(jié)合物。但在HBsAg的檢測中應(yīng)注意亞型問題,HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4個亞型,雖然每種亞型均有相同的a決定簇的反應(yīng)性,這也是用單抗作夾心法應(yīng)注意的問題。
雙抗體夾心法測抗原的另一注意點是類風(fēng)濕因子(RF)的干擾。RF是一種自身抗體,多為IgM型,能和多種動物IgG的Fc段結(jié)合。用作雙抗體夾心法檢測的血清標本中如含有RF,它可充當抗原成份,同時與固相抗體和酶標抗體結(jié)合,表現(xiàn)出假陽性反應(yīng)。采用F(ab')或Fab片段作酶結(jié)合物的試劑,由于去除了Fc段,從而消除RF的干擾。雙抗體夾心法ELISA試劑是否受RF的影響,已被列為這類試劑的一項考核指標。
雙抗體夾心法適用于測定二價或二價以上的大分子抗原,但不適用于測定半抗原及小分子單價抗原,因其不能形成兩位點夾心。
人碳酸酐酶2(CA-2)ELISA試劑盒的優(yōu)點
特異性高:進行了廣泛的非特異性排查,避免了由于交叉反應(yīng)和干擾導(dǎo)致的實驗數(shù)據(jù)誤差。
精度高:通過加標回收率和線性稀釋實驗,確保樣本值的準確性,精確度高于同類產(chǎn)品(較低的CV%)。
重復(fù)性好:lot-to-lot檢測確保小的批間差異。
可靠性強:經(jīng)優(yōu)化的試劑盒組分可有效的阻止假陽性和假陰性試驗結(jié)果。
標準曲線:在保證精準數(shù)據(jù)的前提下提供較寬的檢測范圍,以滿足需求。
價格低廉:原裝進口RD試劑,國內(nèi)分裝配置,大大減少了客戶因為價格高而必須購買國產(chǎn)試劑盒的顧慮。
ELISA試劑盒操作程序
1. 確定本次檢測所需的已包被抗體的酶標板孔數(shù)目。
2. 將倍比稀釋的標準品各0.1ml依次加入一排7孔中,1孔只加樣品稀釋液的作為對照。處理后的標本按100ul每孔加入。
3. 酶標板加上蓋,37℃反應(yīng)90分鐘。
4. 反應(yīng)后用自動洗板機吸去酶標板內(nèi)的液體;或甩去酶標板內(nèi)液體,再對著吸水紙拍幾下。洗滌2次。
5. 將準備好的生物素抗體工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反應(yīng)60分鐘。
6. 0.01M TBS或0.01M PBS洗滌3次,每次浸泡1分鐘左右。
7. 將準備好的ABC工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反應(yīng)30分鐘。
8. 0.01M TBS或0.01M PBS洗滌5次,每次浸泡1-2分鐘左右。
9. 按每孔0.1ml依次加入TMB顯色工作液,37℃避光反應(yīng),反應(yīng)過程中,要經(jīng)常的觀察,當肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔差別不明顯時,即可加入TMB終止液0.1ml/孔。(顯色反應(yīng)長不要超過30分鐘)。
10. 用酶標儀在450nm測定O.D.值。
11. 根據(jù)樣品的吸光值在坐標上找出對應(yīng)的濃度。用戶也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。應(yīng)記住由于樣品稀釋了N倍,其實際濃度應(yīng)該×N。
質(zhì)量保證與免責(zé)聲明
1、我們保證向用戶提供完全合格的產(chǎn)品。如您認為產(chǎn)品確實存在質(zhì)量問題,請在收 到產(chǎn)品21天內(nèi)并且產(chǎn)品使用量沒有超過一半前以書面方式提出,否則將不予受理或賠償。同時產(chǎn)品賠償只限于產(chǎn)品價值本身,不涉及其他任何損失。如果您的樣品 非常珍貴,請務(wù)必先使用適當?shù)年栃詫φ者M行檢測,在檢測體系建立起來以后,再檢測您非常珍貴的樣品。
2、若因用戶貯存或使用不當所引起的質(zhì)量投訴,我們不予承擔責(zé)任。除質(zhì)量原因外的其它任何問題,例如缺乏使用某種試劑盒所需的儀器,訂購錯了試劑盒等,我們不承擔任何責(zé)任,也不接受非質(zhì)量原因引起的客戶投訴。
3、如發(fā)現(xiàn)產(chǎn)品有任何缺漏或破損,請在收到產(chǎn)品后2個工作日內(nèi)通知我們。
4、我們提供的所有產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究使用,不得用于臨床診斷或治療,不得存放于普通住宅內(nèi)。如有單位或個人擅自改變我們產(chǎn)品的用途,或存放于不適當?shù)牡胤,我們不承擔任何?zé)任。
ELISA試劑盒發(fā)貨
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收貨提醒
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ELISA試劑盒發(fā)票
1.本公司一律開具正規(guī)發(fā)票,上海市國家稅務(wù)局通用機打發(fā)票。
2.開票的客戶,請?zhí)峁┛蛻艄久Q。
人碳酸酐酶2(CA-2)ELISA試劑盒:
一種產(chǎn)品,兩種包裝
進口分裝:可靠的實驗結(jié)果,且還具有優(yōu)廉的價格,更經(jīng)濟實惠;
原裝進口:優(yōu)質(zhì)的質(zhì)量,高的靈敏度、精密度、重現(xiàn)性、特異性,幫您在實驗室更加節(jié)省時間,全面的技術(shù)服務(wù)—讓客戶買的放心,用得舒心!
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