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首頁 > 原裝ELISA試劑盒 > Human Elisa kit>人高分子量細胞角蛋白(CK-HMW)ELISA試劑盒

人高分子量細胞角蛋白(CK-HMW)ELISA試劑盒

[商品編號]:HY-11217K

[CAS]:無

[英文名稱]:Human cytokeratin High Molecular Weight,CK-HMW ELISA KIT

[分子式]:

[分子量]:[品  牌]:R&D

[庫  存]: 100 盒

[數(shù)  量]:

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  • 人高分子量細胞角蛋白(CK-HMW)ELISA試劑盒 48T/96T 99.99% ¥4800 1000 立即訂購

產(chǎn)品描述

人高分子量細胞角蛋白(CK-HMW)ELISA試劑盒實驗原理
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗C3抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗C3抗體、HRP標記的親和素,經(jīng)過徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的C3呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
試劑盒組成 
120倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液3ml×1瓶
2酶標試劑3ml×1瓶8標準品(384ng/L)0.5ml×1瓶
3酶標包被板12孔×4條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶
4樣品稀釋液3ml×1瓶10說明書1份
5顯色劑A液3ml×1瓶11封板膜2張 
6顯色劑B液3ml×1/瓶12密封袋1個
標本要求 
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
標本的采集及保存
1. 血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:請1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
4. 樣本處理:血清或血漿標本推薦稀釋10,000倍。
注:以上標本置4℃保存應小于1周,-20℃或-80℃均應密封保存,-20℃不應超過1個月,-80℃不應超過2個月;標本溶血會影響后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
人高分子量細胞角蛋白(CK-HMW)ELISA試劑盒操作步驟
1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
192ng/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
96ng/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
48ng/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
24ng/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
12ng/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液


2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 
4.配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
操作程序總結:


計算
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。 
注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間好控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月

人高分子量細胞角蛋白(CK-HMW)ELISA試劑盒使用說明書我們將以高度的責任感和出色的產(chǎn)品質量為客戶提供高品質的產(chǎn)品和實驗技術解決方案。豐富的經(jīng)驗、優(yōu)良的品質、充足的庫存、準確的交貨時間、極具競爭力的價格,所有這些保證了我們向您提供的專業(yè)優(yōu)質的服務。優(yōu)惠促銷,所有ELISA試劑盒均以超低折扣價讓利客戶,全程免費技術指導,提供免費代測服務,歡迎新老客戶來電咨詢詳情。

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