一.參數(shù)規(guī)格
【產(chǎn)品名稱】:人前列腺素F(PGF)ELISA試劑盒
【產(chǎn)品用途】:被測樣品定性定量分析
【產(chǎn)品規(guī)格】:96T/48T(兩種規(guī)格)
【檢測方法】:酶免法/酶聯(lián)免疫法(ELISA)
【保存條件】:2-8℃
【供 貨 期】:1-3天(現(xiàn)貨供應(yīng))
【產(chǎn)品性狀】:液體盒裝
【產(chǎn)品價格】:電議(含稅含運(yùn)費(fèi),我們?nèi)烫峁?/font>ELISA實驗技術(shù)指導(dǎo)和ELISA試劑盒免費(fèi)代測)
【銷售優(yōu)勢】:價格行業(yè)優(yōu)勢、質(zhì)量可靠、如果出現(xiàn)客觀質(zhì)量問題包換退
【待檢樣本】:體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等
【試劑盒種屬】:鹿、羊、雞、鴨、狼、魚、馬、牛、人、大鼠、犬、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、馬鈴薯、兔子、豬、猴等動植物。
二.樣品收集、處理及保存
1).細(xì)胞培養(yǎng)上清:
適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2)細(xì)胞:
用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3)血清:
在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5)體液:
包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.)組織標(biāo)本:
切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:
如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
三.ELISA試劑盒組成
產(chǎn)品組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | Storage |
標(biāo)準(zhǔn)品:180ng/L | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃ |
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃ |
酶標(biāo)試劑 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃ |
樣品稀釋液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃ |
顯色劑A液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃ |
顯色劑B液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃ |
終止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃ |
濃縮洗滌液 | (20ml×20倍)×1瓶 | (20ml×30倍)×1瓶 | 2-8℃ |
酶標(biāo)包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃ |
封板膜 | 2片 | 2片 | RT |
密封袋 | 1個 | 1個 | RT |
說明書 | 1份 | 1份 | RT |
四.操作步驟
五.實驗原理
人前列腺素F(PGF)ELISA試劑盒用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或者標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過徹底洗滌后用底物顯色。底物在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品濃度呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定OD值,計算樣品濃度。
實驗過程
加樣→ 孵育→ 檢測抗體→ 顯色→ 讀數(shù) →數(shù)據(jù)分析
數(shù)據(jù)處理及報告
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。
六.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制方法
可以采用各種繪圖軟件來繪制ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線,我公司以“Curve Exert1.3”軟件為例,繪制的ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線如下:
計算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度
七.客戶評價:
人前列腺素F(PGF)ELISA試劑盒包裝:在采樣、發(fā)送、運(yùn)輸過程中有保冷溫度要求的,公司均采用加厚款生物保溫箱,內(nèi)裝生物冰袋,有效的控制產(chǎn)品溫度,保證貨物質(zhì)量不受影響,同時并填充大量EPE發(fā)泡棉,具有優(yōu)越的緩沖彈性,它就像成千上萬的小彈簧緊緊地保護(hù)在郵寄物品周圍,它能有效的吸收嚴(yán)酷的沖擊力,使郵寄物品免于破損,保證貨物完好送達(dá)您手。
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