一、改良Frey氏培養(yǎng)基基礎(chǔ)基本概述

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顯色培養(yǎng)基是一類利用微生物自身代謝產(chǎn)生的酶與相應(yīng)顯色底物反應(yīng)顯色的原理來檢測微生物的新型培養(yǎng)基。這些相應(yīng)的顯色底物是由產(chǎn)色基因和微生物部分可代

謝物質(zhì)組成，在特異性酶作用下，游離出產(chǎn)色基因顯示一定顏色，直接觀察菌落顏色即可對菌種作出鑒定。它是一種新型分離培養(yǎng)基，利用顯色培養(yǎng)基進行微生物的

篩選分離，其反應(yīng)的靈敏度和特異性大大優(yōu)于傳統(tǒng)培養(yǎng)基。

二、改良Frey氏培養(yǎng)基基礎(chǔ)特點

1、 培養(yǎng)基中添加了微生物特異性酶顯色底物。

2、 高特異性和靈敏度。

3、 簡便、快速、技術(shù)要求低，結(jié)果在18-24小時內(nèi)出現(xiàn)。

4、 通過明顯的色澤或熒光變化直觀地判讀結(jié)果。

5、 特別適用于監(jiān)測大批量的樣本中微生物的篩選與鑒定，陰性結(jié)果預(yù)測值高，節(jié)省繁瑣的生化鑒定。

6、 允許在平板上直接進行下一步的鑒定。

7、 經(jīng)濟，減少大量的人力和物力。

三、貯藏要求

⑴商品化培養(yǎng)基應(yīng)根據(jù)使用說明書上的要求進行儲存。培養(yǎng)基標簽上應(yīng)標有批號，生產(chǎn)日期、有效期及培養(yǎng)基的有關(guān)特性。所采用的保藏和運輸條件應(yīng)使培養(yǎng)基低限度失去水分并提供機械保護。

⑵配制好的培養(yǎng)基應(yīng)保存在2～25℃避光的環(huán)境。若保存于非密閉容器中，一般在三周內(nèi)使用；若保存于密閉容器中，一般在一年內(nèi)使用，瓊脂培養(yǎng)基不得在0℃或0

℃以下存放，防止冷凍破壞凝膠特性。若培養(yǎng)基要長期保存，瓊脂平板應(yīng)密閉包裝或置于密閉容器中以防止水分流失。

⑶培養(yǎng)基滅菌后應(yīng)立即取出，不得儲藏在高壓  菌器中，避免影響培養(yǎng)基的質(zhì)量。制備好的培養(yǎng)基應(yīng)保存在2～25℃、避光的環(huán)境。

⑷保存于密閉容器中，可防止水分流失以延長保存時間。

⑸固體培養(yǎng)基滅菌后的再融化應(yīng)在加熱的水浴中或采用流通蒸汽進行，只允許一次，融化的培養(yǎng)基應(yīng)放在45～50℃的水浴中，不得超過8小時。

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四、改良Frey氏培養(yǎng)基基礎(chǔ)的配制注意事項
培養(yǎng)基是絕大多數(shù)微生物試驗的基礎(chǔ)。因此，培養(yǎng)基的質(zhì)量是微生物試驗成功與否的關(guān)鍵因素。適宜的培養(yǎng)基制備方法、貯藏條件和質(zhì)量控制試驗是提供優(yōu)質(zhì)培養(yǎng)基的保證。
⑴培養(yǎng)基可按處方制備也可使用按處方生產(chǎn)的符合規(guī)定的商品化成品培養(yǎng)基，脫水培養(yǎng)基除附有處方和使用說明外還應(yīng)注明有效期、貯存條件、適用性試驗的質(zhì)控菌株和用途。配制時應(yīng)按使用說明上的要求操作，受潮結(jié)塊不能使用，以確保培養(yǎng)基的質(zhì)量符合要求。
⑵配制培養(yǎng)基使用的容器應(yīng)是玻璃器皿或搪瓷器皿如搪瓷筒、量筒、漏斗、三角燒瓶、刻度吸管、試管、培養(yǎng)皿等。使用的器皿應(yīng) 洗凈，用蒸餾水沖凈，烘干后方可使用。禁用金屬容器如鐵、銅、鋁容器，避免金屬離子與培養(yǎng)基成分結(jié)合，生成有害物質(zhì)，影響細菌生長。
⑶培養(yǎng)基若于非潔凈的玻璃器皿中制備，可能導(dǎo)致抑菌物質(zhì)進入培養(yǎng)基中。抑菌物質(zhì)可能是殘留的玻璃器皿清潔用的清潔劑或之前玻璃器皿所盛裝的物質(zhì)。因此。應(yīng)使用純化水完全沖洗玻璃器皿以消除清潔劑和外來物質(zhì)的殘留，并進行清除污物的確認。
⑷ 配制培養(yǎng)基常用的溶劑是純化水，特殊情況下需要用去離子水和蒸餾水，對熱敏感的培養(yǎng)基應(yīng)用滅菌水和無菌容器配制與分裝，配制時若需加熱助溶應(yīng)注意溫度不要過高
⑸、對配制培養(yǎng)基的過程作詳細的記錄，記錄內(nèi)容包括：配制日期、培養(yǎng)基名稱、成分、配制數(shù)量、質(zhì)量監(jiān)控結(jié)果等進行全面詳細記錄。