一.參數(shù)規(guī)格
【產(chǎn)品名稱(chēng)】:人晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒
【產(chǎn)品用途】:被測(cè)樣品定性定量分析
【產(chǎn)品規(guī)格】:96T/48T(兩種規(guī)格)
【檢測(cè)方法】:酶免法/酶聯(lián)免疫法(ELISA)
【保存條件】:2-8℃
【供 貨 期】:1-3天(現(xiàn)貨供應(yīng))
【產(chǎn)品性狀】:液體盒裝
【產(chǎn)品價(jià)格】:電議(含稅含運(yùn)費(fèi),我們?nèi)烫峁?/font>ELISA實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)和ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè))
【銷(xiāo)售優(yōu)勢(shì)】:價(jià)格行業(yè)優(yōu)勢(shì)、質(zhì)量可靠、如果出現(xiàn)客觀質(zhì)量問(wèn)題包換退
【待檢樣本】:體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等
【試劑盒種屬】:鹿、羊、雞、鴨、狼、魚(yú)、馬、牛、人、大鼠、犬、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、馬鈴薯、兔子、豬、猴等動(dòng)植物。
二.樣品收集、處理及保存
1).細(xì)胞培養(yǎng)上清:
適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無(wú)菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2)細(xì)胞:
用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右,通過(guò)反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測(cè)。
3)血清:
在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測(cè)。
4)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5)體液:
包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.)組織標(biāo)本:
切取組織標(biāo)本,稱(chēng)取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:
如果樣品不能立即檢測(cè),應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
三.ELISA試劑盒組成
產(chǎn)品組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | Storage |
標(biāo)準(zhǔn)品:180ng/L | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃ |
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃ |
酶標(biāo)試劑 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃ |
樣品稀釋液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃ |
顯色劑A液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃ |
顯色劑B液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃ |
終止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃ |
濃縮洗滌液 | (20ml×20倍)×1瓶 | (20ml×30倍)×1瓶 | 2-8℃ |
酶標(biāo)包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃ |
封板膜 | 2片 | 2片 | RT |
密封袋 | 1個(gè) | 1個(gè) | RT |
說(shuō)明書(shū) | 1份 | 1份 | RT |
四.操作步驟
五.實(shí)驗(yàn)原理
人晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或者標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后用底物顯色。底物在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品濃度呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定OD值,計(jì)算樣品濃度。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程
加樣→ 孵育→ 檢測(cè)抗體→ 顯色→ 讀數(shù) →數(shù)據(jù)分析
數(shù)據(jù)處理及報(bào)告
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。
六.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制方法
可以采用各種繪圖軟件來(lái)繪制ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線,我公司以“Curve Exert1.3”軟件為例,繪制的ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線如下:
人晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒計(jì)算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度
七.退換貨承諾
一、退貨
我司所有商品均享受七天內(nèi)退換貨,為保障雙方權(quán)益,退換貨需要滿(mǎn)足以下條件:
1、退換商品應(yīng)保持收到商品時(shí)的原包裝,不影響第二次銷(xiāo)售,如有開(kāi)具過(guò)發(fā)票,需同時(shí)與商品一同寄回;
2、退換貨時(shí)間從買(mǎi)家簽收包裹當(dāng)天開(kāi)始累積。若出現(xiàn)以下情況,不予退換貨:
1、商品無(wú)重大問(wèn)題,卻遭人為損壞等,影響二次銷(xiāo)售;
2、配件、包裝等被嚴(yán)重?fù)p壞或丟失;
3、由買(mǎi)家原因造成的二次退換。
二、換貨
產(chǎn)品放進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)海綿紙盒,做到防潮、防壓、防晃動(dòng),避免運(yùn)輸途中被震碎壓碎。
買(mǎi)家在收貨的時(shí)候請(qǐng)打開(kāi)包裝檢查,如果發(fā)現(xiàn)破損,在第一時(shí)間與我們的客服人員聯(lián)系,并將受損圖片傳給我們。確認(rèn)破損非買(mǎi)家行為造成后,我們?cè)谑盏酵嘶厣唐凡⒋_認(rèn)無(wú)誤后將給您重新發(fā)貨。
三、退換貨運(yùn)費(fèi)
非商家責(zé)任(商品質(zhì)量問(wèn)題)而由買(mǎi)家發(fā)起的退換行為,所有郵費(fèi)均由買(mǎi)家承擔(dān);我司收到退回商品確認(rèn)無(wú)誤后將及時(shí)換貨或者退回貨款。
由于商品存在質(zhì)量問(wèn)題引起的退換貨行為所產(chǎn)生的郵費(fèi)先由買(mǎi)家墊付,我司負(fù)責(zé)郵費(fèi)補(bǔ)償;我司收到退回商品確認(rèn)無(wú)誤后將及時(shí)換貨或者退回貨款。
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