基本參數(shù)

【產(chǎn)品名稱】：人蛋白激酶B(PKB)ELISA試劑盒

【供 貨 期】：1-3天(現(xiàn)貨供應)

【產(chǎn)品用途】：被測樣品定性定量分析

【產(chǎn)品規(guī)格】：96T/48T(兩種規(guī)格)

【檢測方法】：酶免法/酶聯(lián)免疫法(ELISA)

【保存條件】：2-8℃

【產(chǎn)品性狀】：液體盒裝

【產(chǎn)品價格】：(含稅含運費，我們?nèi)�程提�?/font>ELISA實驗技術指導和ELISA試劑盒免費代測)

【銷售優(yōu)勢】：價格行業(yè)優(yōu)勢、質量可靠、如果出現(xiàn)客觀質量問題包換退

【待檢樣本】：體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等

試劑盒組成

注：標準品用標準品稀釋液依次稀釋為：80、40、20、10、5、2.5 pg/ml

試劑的準備

 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。

操作步驟

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；

3.  待測樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；

4.  隨后標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。

人蛋白激酶B(PKB)ELISA試劑盒的類型
　　ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。在這種測定方法中有三個必要的試劑：（1）固相的抗菌素原或抗體，即"免疫吸附劑"（immunosorbent）；（2）酶標記的抗原或抗體，稱為"結合物"（conjugate）；（3）酶反應的底物。根據(jù)試劑的來源和標本的情況以及檢測的具體條件，可設計出各種不同類型的檢測方法。用于臨床檢驗的ELISA主要有以下幾種類型：
雙抗原夾心法測抗體

反應模式與雙抗體夾心法類似。用特異性抗原進行包被和制備酶結合物，以檢測相應的抗體。與間接法測抗體的不同之處為以酶標抗原代替酶標抗抗體。此法中受檢標本不需稀釋，可直接用于測定，因此其敏感度相對高于間接法。乙肝標志物中抗HBs的檢測常采用本法。本法關鍵在于酶標抗原的制備，應根據(jù)抗原結構的不同，尋找合適的標記方法。
間接法測抗體

　　間接法是檢測抗體常用的方法。其原理為利用酶標記的抗抗體（抗人免疫球蛋白抗體）以檢測與固相抗原結合的受檢抗體，故稱為間接法（見圖2-3）。操作步驟如下：
1）將特異性抗原與固相載體聯(lián)結，形成固相抗原。洗滌除去未結合的抗原及雜質。
2）加稀釋的受檢血清，保溫反應。血清中的特異抗體與固相抗原結合，形成固相抗原抗體復合物。經(jīng)洗滌后，固相載體上只留下特異性抗體，血清中的其他成份在洗滌過程中被洗去。
3）加酶標抗抗體�？捎妹笜丝谷薎g以檢測總抗體，但一般多用酶標抗人IgG檢測IgG抗體。固相免疫復合物中的抗體與酶標抗體抗體結合，從而間接地標記上酶。洗滌后，固相載體上的酶量與標本中受檢抗體的量正相關。
4）加底物顯色
本法主要用于對病原體抗體的檢測而進行傳染病的診斷。間接法的優(yōu)點是只要變換包被抗原就可利用同一酶標抗抗體建立檢測相應抗體的方法。
間接法成功的關鍵在于抗原的純度。雖然有時用粗提抗原包被也能取得實際有效的結果，但應盡可能予以純化，以提高試驗的特異性。特別應注意除去能與一般健康人血清發(fā)生反應的雜質，例如以E.Coli為工程酶的重組抗原，如其中含有E.Coli成份，很可能與受過E.Coli感染者血甭中的抗E.Coli抗體發(fā)生反應。抗原中也不能含有與酶標抗人Ig反應的物質，例如來自人血漿或人體組織的抗原，如不將其中的Ig去除，試驗中也發(fā)生假陽性反
應。另外如抗原中含有無關蛋白，也會因竟爭吸附而影響包被效果。
間接法中另一種干擾因素為正常血清中所含的高濃度的非特異性。病人血清中受檢的特異性IgG只占總IgG中的一小部分。IgG的吸附性很強，非特異IgG可直接吸附到固相載體上，有時也可吸附到包被抗原的表面。因此在間接法中，抗原包被后一般用無關蛋白質（例如牛血清蛋白）再包被一次，以封閉（blocking）固相上的空余間隙。另外，在檢測過程中標本須先行稀釋（1:40~1:200），以避免過高的陰性本底影響結果的判斷。
 

試劑盒說明

1. 在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染，試劑避免受到微生物的污染，因為蛋白水解酶的干擾將導致出現(xiàn)錯誤的結果。

2. 小心吸取試劑并嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。請注意在吸取標本 / 標準品，酶結合物或底物時，第一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的 “預孵育”時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。而且，洗滌不充分將影響試驗結果。

3. 試劑盒保存：部分試劑保存于-20℃，部分試劑保存于2-8℃，具體以標簽上的標示為準。

4. 濃洗滌液會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。

5. 剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質，此為正�，F(xiàn)象，不會對實驗結果造成任何影響。

6. 中、英文說明書可能會有不一致之處，請以英文說明書為準。

7. 所有的樣品都應管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。

8. 有效期：6個月

結果判斷

 繪制標準曲線：在Excel工作表中，以標準品濃度作橫坐標，對應OD值作縱坐標，繪制出標準品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。

產(chǎn)品特點：

極高品質—高品質的抗體和試劑是ELISA試劑盒的基礎

精確特異—特異檢測目標分子，結果精確可重復

高度靈敏—可檢測到pg/mL級別的目標

種類齊全—可覆蓋人、大鼠、小鼠、棉鼠、獼猴、豬、馬、犬和貓等多個種屬

實力保障—實驗標準曲線完美、超強特異性、高靈敏度等優(yōu)點

優(yōu)化設計—可拆卸式96孔板(12X8)，為血清、血漿、尿樣和細胞培養(yǎng)物樣本檢測進行優(yōu)化

人蛋白激酶B(PKB)ELISA試劑盒特別提醒：
1.取樣和存樣所用的凍存管、離心管、吸頭等需高溫滅菌處理；
2.所有存樣管口需以封口膜封好；
3.所有樣品管壁需要用防水記號筆清晰標明編號（便于區(qū)分即可）；
4.所有樣品避免反復凍融
5.如有特別要求，請與服務該區(qū)域的銷售經(jīng)理講明。
好消息：我們可以為您的實驗量身定做市場上沒有的ELISA KIT，您只需要提供或讓我們代買:包被抗體、檢測抗體和蛋白標準品即可.全國一級代理商優(yōu)惠大酬賓，含稅含運費，歡迎來電咨詢。