一.參數規(guī)格
【產品名稱】:人酪氨酸激酶2(Tyk-2)ELISA試劑盒
【產品用途】:被測樣品定性定量分析
【產品規(guī)格】:96T/48T(兩種規(guī)格)
【檢測方法】:酶免法/酶聯(lián)免疫法(ELISA)
【保存條件】:2-8℃
【供 貨 期】:1-3天(現貨供應)
【產品性狀】:液體盒裝
【產品價格】:電議(含稅含運費,我們全程提供ELISA實驗技術指導和ELISA試劑盒免費代測)
【ELISA檢測試劑盒種屬】:鹿、羊、雞、鴨、狼、魚、馬、牛、人、大鼠、犬、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、馬鈴薯、兔子、豬、猴等動植物。
【銷售優(yōu)勢】:價格行業(yè)優(yōu)勢、質量可靠、如果出現客觀質量問題包換退
【待檢樣本】:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等
樣品采集:收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天進行檢測的標本,儲存在4℃?zhèn)溆,如有特殊原因需要周期收集標本,將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時,-20℃可保存1個月。-70℃可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。
【產品保質期】:半年(六個月)
二、實驗原理:
結合在固相載體表面的抗原或抗體與受檢標本(抗原或抗體)起反應。用洗滌的方法洗去未結合的抗原或抗體。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,根據呈色的深淺進行定性或定量分析。根據實際的應用方法,可以分成以下幾種:
雙抗夾心 ELISA:將捕獲抗體包被在固相載體上,封閉后加入待檢抗原,溫育后加入酶標檢測抗體,捕獲抗體和檢測抗體可以是針對不同表位的兩種單抗,也可以是針對同一抗原的一種單抗與一種多抗,但是檢測抗體需要經過酶標。
競爭ELISA:用待檢抗原或抗體去干擾已經預先設計好的體系,終顯色的結果與待檢抗原或抗體的干擾程度成負相關。主要應用于只有一個抗原表位的蛋白檢測。
多因子ELISA檢測技術:多重ELISA芯片技術通過在96孔板的每個孔中以陣列的形式植入1~25種捕獲抗體,隨后像ELISA一樣操作,通過化學發(fā)光(HRP酶)和熒光燃料(紅外)來檢測。
受刺激的細胞產生的細胞因子是短暫的,并且不同細胞因子基因表達的動力學是變化的。通過ELISA實驗只能檢測到的免疫反應性的細胞因子蛋白的含量,而這并不能完全代表細胞因子的生物活性的水平。例如,使用抗細胞因子抗體的一種ELISA不能區(qū)別如TGF-β1的細胞因子蛋白是無活性的前體形式還是有活性的成熟蛋白。此外,一種ELISA可以檢測部分降解的細胞因子蛋白,它們仍有免疫反應性(例如至少可識別兩個表位),當時它可能卻喪失了它們的生物學活性。
三、樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固 10-20 分鐘,離心 20分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據標本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合 10-20 分鐘后,離心20 分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分) 。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用 PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到 100 萬/ml 左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心 20 分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的 PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆。標本融化后仍然保?2-8℃的溫度。加入一定量的 PBS(PH7.4) ,用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心 20 分鐘左右(2000-3000轉/分) 。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
四、人酪氨酸激酶2(Tyk-2)ELISA試劑盒優(yōu)點:
◆精心挑選的抗體對、標準品、顯色劑和酶標板全部為進口產品實現佳性能;
◆原材料批量進口加上自配的特殊配方稀釋劑保證高品質產品性能的同時兼顧成本;
◆采用先進專利技術,嚴格按照標準生產方案組裝生產;
◆預包被微孔板的批內和批間變異系數均小于10 %;
◆經過嚴格交叉反應和干擾測試及穩(wěn)定性試驗;
◆明確的敏感度;
◆針對所有樣品類型達到佳的性能;
◆廣泛的檢測范圍可以滿足大多數檢測要求;
◆完善的售后服務和免費的技術支持免去您的后顧之憂;
◆強大的生產能力和充足的儲備、操作熟練的技術人員及高效的生產流程,隨時可以組裝出您定制的產品。 僅供實驗大鼠、小鼠、兔等實驗動物標本檢測使用!
五、常見問題解答
1. 正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質包被的適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值大而蛋白量少的濃度。對于多數蛋白質來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
六、使用指南
步驟 | 常見問題 | 解決方案 |
實驗準備 | 1 加樣器不準確;尤其10ul以下的加樣器,對結果影響極大; | 1 校正加樣器;10ul以下加樣器好采用進口產品(芬蘭、法國等); |
樣品加樣 | 1 加樣不準確; | 1 加樣時一定要仔細。加樣后,再檢查,以防漏加、錯加。 |
洗滌 | 洗滌不徹底 | 1 每次注水洗滌,應靜止30秒鐘; |
加酶反應 | 漏加 | 滴加后,認真檢查各孔 |
試劑保存 | 保存不規(guī)范 | 一定要在2-8℃存放。不得過高,也不得凍存(凍存后,酶液將失效)。 |
對照品 | 對照品為凍干品 | 按對照管標示,加入相應體積的去離子水或蒸餾水復溶,充分溶解混勻?砂凑f明書使用。 |
七、訂購流程
1.絕大部分產品備有現貨,一般情況下都能訂貨當日發(fā)貨。
2.部分非常用產品,需提前1-2日預訂,海外期貨則需要提前3-6周預訂。
3.部分產品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當日新價格為準。
八、代測服務
服務項目 | 內容說明 | 提交結果 | 周期 |
間接法ELISA檢測 | 客戶提供檢測材料 | 檢測試驗報告 | 1周 |
夾心法ELISA檢測 | 客戶提供檢測材料和檢測試劑盒 | 檢測試驗報告 | 1周 |
競爭法ELISA檢測 | 客戶提供檢測材料和檢測試劑盒 | 檢測試驗報告 | 2周 |
① 客戶以快遞形式送標本,上海市內客戶代測樣本可享我司上門取樣服務。
② 客戶的標本嚴格遵循標本的前處理原則。
③ 本公司代測服務提供真實的機讀OD值結果和照片。
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