[商品編號]:HY-60024K
[CAS]:無
[英文名稱]:Chicken infectious coryza,ic ELISA KIT
[分子式]:
[分子量]:[品 牌]:R&D
[庫 存]: 100 盒
一.參數(shù)規(guī)格
【產(chǎn)品名稱】:雞傳染性鼻炎抗體(IC)酶聯(lián)免疫試劑盒
【產(chǎn)品用途】:被測樣品定性定量分析
【產(chǎn)品規(guī)格】:96T/48T(兩種規(guī)格)
【檢測方法】:酶免法/酶聯(lián)免疫法(ELISA)
【保存條件】:2-8℃
【供 貨 期】:1-3天(現(xiàn)貨供應(yīng))
【產(chǎn)品性狀】:液體盒裝
【產(chǎn)品價格】:電議(含稅含運費,我們?nèi)烫峁?/font>ELISA實驗技術(shù)指導(dǎo)和ELISA試劑盒免費代測)
【ELISA檢測試劑盒種屬】:鹿、羊、雞、鴨、狼、魚、馬、牛、人、大鼠、犬、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、馬鈴薯、兔子、豬、猴等動植物。
【銷售優(yōu)勢】:價格行業(yè)優(yōu)勢、質(zhì)量可靠、如果出現(xiàn)客觀質(zhì)量問題包換退
【待檢樣本】:體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等
樣品采集:收集標(biāo)本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測的標(biāo)本,儲存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶?biāo)本,將標(biāo)本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本2-8℃可保存48小時,-20℃可保存1個月。-70℃可保存6個月。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。
【產(chǎn)品保質(zhì)期】:半年(六個月)
二、實驗原理:
結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體與受檢標(biāo)本(抗原或抗體)起反應(yīng)。用洗滌的方法洗去未結(jié)合的抗原或抗體。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。根據(jù)實際的應(yīng)用方法,可以分成以下幾種:
雙抗夾心 ELISA:將捕獲抗體包被在固相載體上,封閉后加入待檢抗原,溫育后加入酶標(biāo)檢測抗體,捕獲抗體和檢測抗體可以是針對不同表位的兩種單抗,也可以是針對同一抗原的一種單抗與一種多抗,但是檢測抗體需要經(jīng)過酶標(biāo)。
競爭ELISA:用待檢抗原或抗體去干擾已經(jīng)預(yù)先設(shè)計好的體系,終顯色的結(jié)果與待檢抗原或抗體的干擾程度成負(fù)相關(guān)。主要應(yīng)用于只有一個抗原表位的蛋白檢測。
多因子ELISA檢測技術(shù):多重ELISA芯片技術(shù)通過在96孔板的每個孔中以陣列的形式植入1~25種捕獲抗體,隨后像ELISA一樣操作,通過化學(xué)發(fā)光(HRP酶)和熒光燃料(紅外)來檢測。
受刺激的細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子是短暫的,并且不同細(xì)胞因子基因表達(dá)的動力學(xué)是變化的。通過ELISA實驗只能檢測到的免疫反應(yīng)性的細(xì)胞因子蛋白的含量,而這并不能完全代表細(xì)胞因子的生物活性的水平。例如,使用抗細(xì)胞因子抗體的一種ELISA不能區(qū)別如TGF-β1的細(xì)胞因子蛋白是無活性的前體形式還是有活性的成熟蛋白。此外,一種ELISA可以檢測部分降解的細(xì)胞因子蛋白,它們?nèi)杂忻庖叻磻?yīng)性(例如至少可識別兩個表位),當(dāng)時它可能卻喪失了它們的生物學(xué)活性。
三、樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固 10-20 分鐘,離心 20分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合 10-20 分鐘后,離心20 分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分) 。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用 PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到 100 萬/ml 左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心 20 分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的 PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆。?biāo)本融化后仍然保持 2-8℃的溫度。加入一定量的 PBS(PH7.4) ,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心 20 分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分) 。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
四、雞傳染性鼻炎抗體(IC)酶聯(lián)免疫試劑盒優(yōu)點:
◆精心挑選的抗體對、標(biāo)準(zhǔn)品、顯色劑和酶標(biāo)板全部為進(jìn)口產(chǎn)品實現(xiàn)佳性能;
◆原材料批量進(jìn)口加上自配的特殊配方稀釋劑保證高品質(zhì)產(chǎn)品性能的同時兼顧成本;
◆采用先進(jìn)專利技術(shù),嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)方案組裝生產(chǎn);
◆預(yù)包被微孔板的批內(nèi)和批間變異系數(shù)均小于10 %;
◆經(jīng)過嚴(yán)格交叉反應(yīng)和干擾測試及穩(wěn)定性試驗;
◆明確的敏感度;
◆針對所有樣品類型達(dá)到佳的性能;
◆廣泛的檢測范圍可以滿足大多數(shù)檢測要求;
◆完善的售后服務(wù)和免費的技術(shù)支持免去您的后顧之憂;
◆強大的生產(chǎn)能力和充足的儲備、操作熟練的技術(shù)人員及高效的生產(chǎn)流程,隨時可以組裝出您定制的產(chǎn)品。 僅供實驗大鼠、小鼠、兔等實驗動物標(biāo)本檢測使用!
五、常見問題解答
1. 正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進(jìn)行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值大而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
六、使用指南
步驟 | 常見問題 | 解決方案 |
實驗準(zhǔn)備 | 1 加樣器不準(zhǔn)確;尤其10ul以下的加樣器,對結(jié)果影響極大; | 1 校正加樣器;10ul以下加樣器好采用進(jìn)口產(chǎn)品(芬蘭、法國等); |
樣品加樣 | 1 加樣不準(zhǔn)確; | 1 加樣時一定要仔細(xì)。加樣后,再檢查,以防漏加、錯加。 |
洗滌 | 洗滌不徹底 | 1 每次注水洗滌,應(yīng)靜止30秒鐘; |
加酶反應(yīng) | 漏加 | 滴加后,認(rèn)真檢查各孔 |
試劑保存 | 保存不規(guī)范 | 一定要在2-8℃存放。不得過高,也不得凍存(凍存后,酶液將失效)。 |
對照品 | 對照品為凍干品 | 按對照管標(biāo)示,加入相應(yīng)體積的去離子水或蒸餾水復(fù)溶,充分溶解混勻?砂凑f明書使用。 |
七、訂購流程
1.絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。
2.部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。
3.部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當(dāng)日新價格為準(zhǔn)。
八、代測服務(wù)
服務(wù)項目 | 內(nèi)容說明 | 提交結(jié)果 | 周期 |
間接法ELISA檢測 | 客戶提供檢測材料 | 檢測試驗報告 | 1周 |
夾心法ELISA檢測 | 客戶提供檢測材料和檢測試劑盒 | 檢測試驗報告 | 1周 |
競爭法ELISA檢測 | 客戶提供檢測材料和檢測試劑盒 | 檢測試驗報告 | 2周 |
① 客戶以快遞形式送標(biāo)本,上海市內(nèi)客戶代測樣本可享我司上門取樣服務(wù)。
② 客戶的標(biāo)本嚴(yán)格遵循標(biāo)本的前處理原則。
③ 本公司代測服務(wù)提供真實的機讀OD值結(jié)果和照片。
凡購買我司雞傳染性鼻炎抗體(IC)酶聯(lián)免疫試劑盒,可全國各地快遞免費包郵(偏遠(yuǎn)地區(qū)請?zhí)貏e注明運輸方式),亦可根據(jù)客戶需求,選擇相應(yīng)的運輸方式,上海地區(qū)免費上門取樣啦。
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