[商品編號(hào)]:HY-18008K
[CAS]:無(wú)
[英文名稱]:Bovine Metallothionein,MT ELISA KIT
[分子式]:
[分子量]:[品 牌]:R&D
[庫(kù) 存]: 100 盒
一.參數(shù)規(guī)格
【產(chǎn)品名稱】:牛金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒
【產(chǎn)品用途】:被測(cè)樣品定性定量分析
【產(chǎn)品規(guī)格】:96T/48T(兩種規(guī)格)
【檢測(cè)方法】:酶免法/酶聯(lián)免疫法(ELISA)
【保存條件】:2-8℃
【供 貨 期】:1-3天(現(xiàn)貨供應(yīng))
【產(chǎn)品性狀】:液體盒裝
【產(chǎn)品價(jià)格】:電議(含稅含運(yùn)費(fèi),我們?nèi)烫峁?/font>ELISA實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)和ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè))
【ELISA檢測(cè)試劑盒種屬】:鹿、羊、雞、鴨、狼、魚、馬、牛、人、大鼠、犬、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、馬鈴薯、兔子、豬、猴等動(dòng)植物。
【銷售優(yōu)勢(shì)】:價(jià)格行業(yè)優(yōu)勢(shì)、質(zhì)量可靠、如果出現(xiàn)客觀質(zhì)量問(wèn)題包換退
【待檢樣本】:體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等
樣品采集:收集標(biāo)本前必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆,如有特殊原因需要周期收集?biāo)本,將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí),-20℃可保存1個(gè)月。-70℃可保存6個(gè)月。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。
【產(chǎn)品保質(zhì)期】:半年(六個(gè)月)
二、實(shí)驗(yàn)原理:
結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體與受檢標(biāo)本(抗原或抗體)起反應(yīng)。用洗滌的方法洗去未結(jié)合的抗原或抗體。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。根據(jù)實(shí)際的應(yīng)用方法,可以分成以下幾種:
雙抗夾心 ELISA:將捕獲抗體包被在固相載體上,封閉后加入待檢抗原,溫育后加入酶標(biāo)檢測(cè)抗體,捕獲抗體和檢測(cè)抗體可以是針對(duì)不同表位的兩種單抗,也可以是針對(duì)同一抗原的一種單抗與一種多抗,但是檢測(cè)抗體需要經(jīng)過(guò)酶標(biāo)。
競(jìng)爭(zhēng)ELISA:用待檢抗原或抗體去干擾已經(jīng)預(yù)先設(shè)計(jì)好的體系,終顯色的結(jié)果與待檢抗原或抗體的干擾程度成負(fù)相關(guān)。主要應(yīng)用于只有一個(gè)抗原表位的蛋白檢測(cè)。
多因子ELISA檢測(cè)技術(shù):多重ELISA芯片技術(shù)通過(guò)在96孔板的每個(gè)孔中以陣列的形式植入1~25種捕獲抗體,隨后像ELISA一樣操作,通過(guò)化學(xué)發(fā)光(HRP酶)和熒光燃料(紅外)來(lái)檢測(cè)。
受刺激的細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子是短暫的,并且不同細(xì)胞因子基因表達(dá)的動(dòng)力學(xué)是變化的。通過(guò)ELISA實(shí)驗(yàn)只能檢測(cè)到的免疫反應(yīng)性的細(xì)胞因子蛋白的含量,而這并不能完全代表細(xì)胞因子的生物活性的水平。例如,使用抗細(xì)胞因子抗體的一種ELISA不能區(qū)別如TGF-β1的細(xì)胞因子蛋白是無(wú)活性的前體形式還是有活性的成熟蛋白。此外,一種ELISA可以檢測(cè)部分降解的細(xì)胞因子蛋白,它們?nèi)杂忻庖叻磻?yīng)性(例如至少可識(shí)別兩個(gè)表位),當(dāng)時(shí)它可能卻喪失了它們的生物學(xué)活性。
三、樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固 10-20 分鐘,離心 20分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合 10-20 分鐘后,離心20 分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分) 。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用 PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到 100 萬(wàn)/ml 左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心 20 分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的 PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持 2-8℃的溫度。加入一定量的 PBS(PH7.4) ,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心 20 分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分) 。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
四、牛金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒優(yōu)點(diǎn):
◆精心挑選的抗體對(duì)、標(biāo)準(zhǔn)品、顯色劑和酶標(biāo)板全部為進(jìn)口產(chǎn)品實(shí)現(xiàn)佳性能;
◆原材料批量進(jìn)口加上自配的特殊配方稀釋劑保證高品質(zhì)產(chǎn)品性能的同時(shí)兼顧成本;
◆采用先進(jìn)專利技術(shù),嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)方案組裝生產(chǎn);
◆預(yù)包被微孔板的批內(nèi)和批間變異系數(shù)均小于10 %;
◆經(jīng)過(guò)嚴(yán)格交叉反應(yīng)和干擾測(cè)試及穩(wěn)定性試驗(yàn);
◆明確的敏感度;
◆針對(duì)所有樣品類型達(dá)到佳的性能;
◆廣泛的檢測(cè)范圍可以滿足大多數(shù)檢測(cè)要求;
◆完善的售后服務(wù)和免費(fèi)的技術(shù)支持免去您的后顧之憂;
◆強(qiáng)大的生產(chǎn)能力和充足的儲(chǔ)備、操作熟練的技術(shù)人員及高效的生產(chǎn)流程,隨時(shí)可以組裝出您定制的產(chǎn)品。 僅供實(shí)驗(yàn)大鼠、小鼠、兔等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)本檢測(cè)使用!
五、常見(jiàn)問(wèn)題解答
1. 正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說(shuō)明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值大而蛋白量少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見(jiàn)酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無(wú)色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
六、使用指南
步驟 | 常見(jiàn)問(wèn)題 | 解決方案 |
實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備 | 1 加樣器不準(zhǔn)確;尤其10ul以下的加樣器,對(duì)結(jié)果影響極大; | 1 校正加樣器;10ul以下加樣器好采用進(jìn)口產(chǎn)品(芬蘭、法國(guó)等); |
樣品加樣 | 1 加樣不準(zhǔn)確; | 1 加樣時(shí)一定要仔細(xì)。加樣后,再檢查,以防漏加、錯(cuò)加。 |
洗滌 | 洗滌不徹底 | 1 每次注水洗滌,應(yīng)靜止30秒鐘; |
加酶反應(yīng) | 漏加 | 滴加后,認(rèn)真檢查各孔 |
試劑保存 | 保存不規(guī)范 | 一定要在2-8℃存放。不得過(guò)高,也不得凍存(凍存后,酶液將失效)。 |
對(duì)照品 | 對(duì)照品為凍干品 | 按對(duì)照管標(biāo)示,加入相應(yīng)體積的去離子水或蒸餾水復(fù)溶,充分溶解混勻?砂凑f(shuō)明書使用。 |
七、訂購(gòu)流程
1.絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。
2.部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。
3.部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日新價(jià)格為準(zhǔn)。
八、代測(cè)服務(wù)
服務(wù)項(xiàng)目 | 內(nèi)容說(shuō)明 | 提交結(jié)果 | 周期 |
間接法ELISA檢測(cè) | 客戶提供檢測(cè)材料 | 檢測(cè)試驗(yàn)報(bào)告 | 1周 |
夾心法ELISA檢測(cè) | 客戶提供檢測(cè)材料和檢測(cè)試劑盒 | 檢測(cè)試驗(yàn)報(bào)告 | 1周 |
競(jìng)爭(zhēng)法ELISA檢測(cè) | 客戶提供檢測(cè)材料和檢測(cè)試劑盒 | 檢測(cè)試驗(yàn)報(bào)告 | 2周 |
① 客戶以快遞形式送標(biāo)本,上海市內(nèi)客戶代測(cè)樣本可享我司上門取樣服務(wù)。
② 客戶的標(biāo)本嚴(yán)格遵循標(biāo)本的前處理原則。
③ 本公司代測(cè)服務(wù)提供真實(shí)的機(jī)讀OD值結(jié)果和照片。
“牛金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒 ”說(shuō)明書:紙質(zhì)產(chǎn)品說(shuō)明書附帶ELISA試劑盒產(chǎn)品盒中,電子說(shuō)明書,我們免費(fèi)提供。
公司幾千種ELISA試劑盒被全國(guó)近萬(wàn)家科研單位和醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)用,發(fā)表論文達(dá)數(shù)萬(wàn)篇。
公司下設(shè)產(chǎn)品研發(fā)部、生產(chǎn)部、質(zhì)檢部、銷售部、發(fā)貨部、財(cái)務(wù)部、后勤部,配備有大型的實(shí)驗(yàn)室,各種生化儀器一應(yīng)俱全,ELISA試劑盒我們可以全程免費(fèi)代測(cè)。
我們的產(chǎn)品:質(zhì)量保證、價(jià)格優(yōu)惠、供貨及時(shí)、服務(wù)周到。
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