魚維生素K1(VK1)ELISA試劑盒
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產(chǎn)品編號:HB866-QT
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【文獻(xiàn)支持】
影響因子(IF)=4.55;Disruption of Abcc6 Transporter in Zebrafish Causes Ocular Calcification and Cardiac Fibrosis;華東師范大學(xué);《INTERNATIONAL JOURNAL OF MOLECULAR SCIENCES》
【產(chǎn)品名稱】
中文名稱:魚維生素K1(VK1)酶聯(lián)免疫試劑盒
【包裝規(guī)格】
96T/盒
【預(yù)期用途】
僅供科研使用,定量檢測血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液等相關(guān)樣本中魚維生素K1(VK1)的濃度。
【儲存條件及有效期】
1、2-8℃保存,切勿冷凍,有效期6個月。
2、開封使用后,包被微孔板放入帶有干燥劑的自封袋中,密閉自封袋,并將全部試劑放回2-8℃冰箱。
注意:試劑盒內(nèi)酶標(biāo)條可拆卸,按實驗需求可分多次使用;使用后的剩余試劑盒建議在首次實驗后1 個月內(nèi)使用完畢。產(chǎn)品過期時間以盒子上的標(biāo)簽為準(zhǔn),保質(zhì)期內(nèi)所有組分都確保是穩(wěn)定的。
【適用儀器】
半自動的酶標(biāo)儀,如Thermo MK3,或者國產(chǎn)酶標(biāo)儀。
【樣本要求】
1.樣本類型和采集
血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置0.5-2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
細(xì)胞裂解液: 吸棄培養(yǎng)液,用PBS(0.01 M,pH 7.4)將細(xì)胞洗一遍。用細(xì)胞刮刮下細(xì)胞(不能用胰酶和EDTA 處理),加入2-5 mL PBS(0.01 M,pH 7.4)。懸浮細(xì)胞可省略。收集細(xì)胞懸液,4℃ 1000×g離心10min,棄去培養(yǎng)基,用預(yù)冷的PBS潤洗3次。加入適量的預(yù)冷PBS或非變性細(xì)胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)重懸細(xì)胞,通常6孔板一個孔的細(xì)胞量需要150-250μL PBS重懸。 將樣品放入-20℃或-80℃,使樣品冷凍,再放室溫解凍樣品,反復(fù)凍融3次,使細(xì)胞充分裂解,也可將樣品進(jìn)行超聲破碎,以達(dá)到裂解的目的。4℃ 10000×g 離心10min,除去細(xì)胞碎片,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.樣本保存和穩(wěn)定性
樣本在2-8℃條件下,可以儲存72h,在- 20℃或-80℃可以儲存6個月及以上。樣本收集后,不是一次檢測完,請按一次用量分裝凍存,避免反復(fù)凍融。
文檔名稱
文檔類型
文件大小
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