品牌 | 恒遠生物 |
貨號 | HYCC20049 |
中文名稱 | 小鼠胚胎成纖維細胞;MEF |
英文名稱 | MEF |
規(guī)格 | T25 |
價格 | 1300 |
形態(tài)特性 | 成纖維細胞樣 |
生長特性 | 貼壁生長 |
特征特性 | 取孕9天的615小鼠胚胎,去除腦、心臟等培養(yǎng)建立。該細胞可用作飼養(yǎng)層細胞,支持胚胎干細胞ES的生長并維持ES未分化的狀態(tài)。當作為飼養(yǎng)層細胞時,MEF需經(jīng)絲裂霉素C處理停止生長。建議作為ES細胞的飼養(yǎng)層時,MEF不要超過6代。 |
培養(yǎng)條件 | DMEM(高糖)+10%FBS |
傳代方法 | 1:2傳代 |
凍存條件 | 無血清細胞凍存液 |
STR |
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特別說明 | 本庫的細胞系(株)僅用于科研工作,未經(jīng)許可不得用于其他目的。使用者不得將本庫細胞系(株)轉讓給第三者。 |
說明書 | 咨詢業(yè)務員獲取 |
細胞收到后處理
細胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸?shù)某R?/span>辦法。收到細胞回到自己的實驗室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內,嚴格無菌操作,培養(yǎng)箱靜置2-4小時。鏡下觀察:未超過80%匯合度時,可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中,加入6ml完全培養(yǎng)基,放入37℃、孵箱培養(yǎng);超過80%匯合度時,根據(jù)情況傳代或者凍存,具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。(注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話,處理完后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松,傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基,另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基)
若是5%CO2的培養(yǎng)箱,可用密封培養(yǎng)瓶,擰緊瓶蓋后放入5%CO2培養(yǎng)箱,48H內要換液一次
細胞培養(yǎng)步驟
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
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