品牌 | 恒遠(yuǎn)生物 |
貨號(hào) | HYCC10288 |
中文名稱 | 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H209 |
英文名稱 | NCI-H209 |
規(guī)格 | T25 |
價(jià)格 | 3000 |
形態(tài)特性 | 上皮樣 |
生長特性 | 懸浮生長,有少數(shù)細(xì)胞疏松貼壁 |
特征特性 | 該細(xì)胞由Gazdar AF及其同事于1979年從一名小細(xì)胞肺癌患者的骨髓轉(zhuǎn)移灶中分離建立,該骨髓標(biāo)本的獲取先于患者的治療。該細(xì)胞是一種典型的小細(xì)胞性肺癌細(xì)胞,表達(dá)較高水平的4種生化標(biāo)志:神經(jīng)特異性烯醇、肌酸激酶腦型同工酶、左旋多巴脫羧酶、鈴蟾肽樣免疫活性。c-myc DNA序列沒有擴(kuò)增;未發(fā)現(xiàn)大的結(jié)構(gòu)DNA的異常;該細(xì)胞合成與正常肺相當(dāng)量的p53 mRNA。該細(xì)胞以聚集體的形式懸浮生長,只有聚集體中的細(xì)胞是有活力的,但是細(xì)胞活率無法估計(jì),一般培養(yǎng)基中含有大量的細(xì)胞碎片。該細(xì)胞表達(dá)異常的RB1蛋白,其706 |
培養(yǎng)條件 | IMDM+10%FBS or RPMI1640+10%FBS 三碘甲腺原氨酸+0.5%(w/v)牛血清白蛋白+10mM HEPES+0.5mM丙酮酸鈉+2mM L-谷氨酰胺。 |
傳代方法 | 1:2~1:4傳代;每周換液2次。 |
凍存條件 | 無血清細(xì)胞凍存液 |
STR | Amelogenin:X,Y;CSF1PO:11;D13S317:11;D16S539:9,12;D18S51:13;D19S433:14.2,15;D21S11:32.2;D2S1338:17,20;D3S1358:18,20;D5S818:12;D7S820:9;D8S1179:12,13;FGA:20,24;TH01:7,9;TPOX:8;vWA:18,19; |
特別說明 | 本庫的細(xì)胞系(株)僅用于科研工作,未經(jīng)許可不得用于其他目的。使用者不得將本庫細(xì)胞系(株)轉(zhuǎn)讓給第三者。 |
說明書 | 咨詢業(yè)務(wù)員獲取 |
細(xì)胞收到后處理
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)某R?/span>辦法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無菌操作,培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)。鏡下觀察:未超過80%匯合度時(shí),可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中,加入6ml完全培養(yǎng)基,放入37℃、孵箱培養(yǎng);超過80%匯合度時(shí),根據(jù)情況傳代或者凍存,具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。(注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話,處理完后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松,傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基,另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基)
若是5%CO2的培養(yǎng)箱,可用密封培養(yǎng)瓶,擰緊瓶蓋后放入5%CO2培養(yǎng)箱,48H內(nèi)要換液一次
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
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