[商品編號]:HY-20003K
[CAS]:無
[英文名稱]:Rat alcohol dehydrogenase,ADH ELISA KIT
[分子式]:
[分子量]:[品 牌]:R&D
[庫 存]: 1000 盒
【產(chǎn)品名稱】:大鼠乙醇脫氫酶(ADH)ELISA試劑盒
【產(chǎn)品用途】:被測樣品定性定量分析
【產(chǎn)品規(guī)格】:96T/48T(兩種規(guī)格)
【檢測方法】:酶免法/酶聯(lián)免疫法(ELISA)
【保存條件】:2-8℃
【供 貨 期】:1-3天(現(xiàn)貨供應(yīng))
【產(chǎn)品性狀】:液體盒裝
【產(chǎn)品價格】:電議(含稅含運費,我們?nèi)烫峁〦LISA實驗技術(shù)指導(dǎo)和ELISA試劑盒免費代測)
【ELISA檢測試劑盒種屬】:鹿、羊、雞、鴨、狼、魚、馬、牛、人、大鼠、犬、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、馬鈴薯、兔子、豬、猴等動植物。
【銷售優(yōu)勢】:價格行業(yè)優(yōu)勢、質(zhì)量可靠、如果出現(xiàn)客觀質(zhì)量問題包換退
【待檢樣本】:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等
樣品采集:收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天進行檢測的標本,儲存在4℃?zhèn)溆,如有特殊原因需要周期收集標本,將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。標本2-8℃可保存48小時,-20℃可保存1個月。-70℃可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。
【大鼠乙醇脫氫酶(ADH)ELISA試劑盒 保質(zhì)期】:半年(六個月)
一、實驗原理:
結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體與受檢標本(抗原或抗體)起反應(yīng)。用洗滌的方法洗去未結(jié)合的抗原或抗體。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。根據(jù)實際的應(yīng)用方法,可以分成以下幾種:
雙抗夾心 ELISA:將捕獲抗體包被在固相載體上,封閉后加入待檢抗原,溫育后加入酶標檢測抗體,捕獲抗體和檢測抗體可以是針對不同表位的兩種單抗,也可以是針對同一抗原的一種單抗與一種多抗,但是檢測抗體需要經(jīng)過酶標。
競爭ELISA:用待檢抗原或抗體去干擾已經(jīng)預(yù)先設(shè)計好的體系,終顯色的結(jié)果與待檢抗原或抗體的干擾程度成負相關(guān)。主要應(yīng)用于只有一個抗原表位的蛋白檢測。
多因子ELISA檢測技術(shù):多重ELISA芯片技術(shù)通過在96孔板的每個孔中以陣列的形式植入1~25種捕獲抗體,隨后像ELISA一樣操作,通過化學(xué)發(fā)光(HRP酶)和熒光燃料(紅外)來檢測。
受刺激的細胞產(chǎn)生的細胞因子是短暫的,并且不同細胞因子基因表達的動力學(xué)是變化的。通過ELISA實驗只能檢測到的免疫反應(yīng)性的細胞因子蛋白的含量,而這并不能完全代表細胞因子的生物活性的水平。例如,使用抗細胞因子抗體的一種ELISA不能區(qū)別如TGF-β1的細胞因子蛋白是無活性的前體形式還是有活性的成熟蛋白。此外,一種ELISA可以檢測部分降解的細胞因子蛋白,它們?nèi)杂忻庖叻磻?yīng)性(例如至少可識別兩個表位),當時它可能卻喪失了它們的生物學(xué)活性。
二、大鼠乙醇脫氫酶(ADH)ELISA試劑盒實驗過程:
三、ELISA操作要點:
1.選擇合適的固相載體;
2.選擇合適的包被緩沖液;
3.確定佳包被量;
4.加樣準確,避免產(chǎn)生氣泡。
四、ELISA試劑盒優(yōu)點:
我司共有14000余種ELISA試劑盒物種涵蓋Human,Mouse,Rat等,暢銷品種具備以下優(yōu)點:
極高品質(zhì)—高品質(zhì)的抗體和試劑是ELISA試劑盒的基礎(chǔ)
精確特異—特異檢測目標分子,結(jié)果精確可重復(fù)
高度靈敏—可檢測到pg/mL級別的目標
種類齊全—可覆蓋人、大鼠、小鼠、棉鼠、獼猴、豬、馬、犬和貓等多個種屬
優(yōu)化設(shè)計—可拆卸式96孔板(12X8),為血清、血漿、尿樣和細胞培養(yǎng)物樣本檢測進行優(yōu)化
五、大鼠乙醇脫氫酶(ADH)ELISA試劑盒
操作過程中可能出現(xiàn)的問題和解決方法 | ||
問題 | 可能原因 | 解決方法 |
顯色淡,靈敏度偏低 | 1、試劑盒在運輸途中時間太長,溫度太高 | 盡量縮短運輸時間,夏季應(yīng)放冰塊降溫 |
| 2、試劑盒未充分平衡 | 試劑盒從2~8℃冰箱取出后打開盒蓋,于室溫平衡至少20分鐘,確保所有試劑已平衡至室溫(約25℃)。 |
| 3、培養(yǎng)箱溫度不足37℃ | 注意培養(yǎng)箱溫度,放入反應(yīng)板后盡量減少開啟次數(shù)以免影響溫度恒定,非隔水式培養(yǎng)箱尤其應(yīng)注意 |
| 4、保溫時間不足 | 校正定時鐘準確定時 |
| 5、洗滌時沖擊力太大、浸泡時間過長、洗滌次數(shù)增加 | 按說明書要求保留洗滌時間,準確記住洗滌次數(shù) |
| 6、移液器吸液量不足,吸嘴內(nèi)壁掛水太多或內(nèi)壁不清潔 | 校正移液器,吸嘴要配套,裝吸嘴時要緊密,吸嘴內(nèi)壁要清潔,好一次性使用 |
| 7、蒸餾水水質(zhì)有問題 | 使用新鮮合格的蒸餾水 |
| 8、底物作用時間不足 | 準確定時 |
背景深,全部呈有色 | 1、洗滌不充分,洗后未拍干,樣品中其它成分殘留或酶標記物殘留 | 濃縮洗液準確配制;10倍濃縮洗滌液如有結(jié)晶則應(yīng)讓結(jié)晶于室溫全部溶解后再量取稀釋;充分洗滌,徹底拍干。加樣或加酶拍板的濾紙應(yīng)棄去不用,不要反復(fù)使用,否則易造成污染 |
| 2、樣品污染 | 樣品應(yīng)新鮮采集,或低溫保存,防止污染 |
| 3、培養(yǎng)箱溫度超過37℃或反應(yīng)時間過長 | 調(diào)整培養(yǎng)箱溫度,準確定時 |
| 4、吸嘴重復(fù)使用,未洗凈或消毒不徹底 | 吸嘴盡可能一次性使用 |
| 5、蒸餾水被污染 | 使用新鮮蒸餾水 |
| 6、酶等試劑混用 | 不同批號試劑勿混用 |
| 7、一次實驗的標本量過多,加樣時間太長,導(dǎo)致實際反應(yīng)時間延長 | 合理安排實驗,避免幾塊酶標板同時加樣 |
重復(fù)性不佳 | 1、樣品數(shù)量多少不一,加樣時間有長有短 | 重復(fù)某一樣品時,加樣時間盡可能與第一次接近 |
| 2、保溫時間不一致,洗滌條件不一致,操作人員不一致 | 重復(fù)測定標本,操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致,以排除這些因素造成的不一致的可能性 |
| 3、加樣量不一致 | 樣品稀釋前應(yīng)充分混勻,盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴 |
出現(xiàn)白板,陽性對照不顯色 | 顯色液變質(zhì) | 更換新的顯色液 |
| 洗滌液配制有誤 | 請按說明書所示稀釋倍數(shù)配制 |
| 未加酶結(jié)合物而認為已加入 | 注意不要漏加 |
| 終止液誤作洗滌液稀釋或當?shù)孜镆菏褂?/span> | 每次加液前均應(yīng)看清標簽 |
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