【樣品采集】：Elisa試劑盒收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天進行檢測的標本，儲存在4℃?zhèn)溆�，如有特殊原因需要周期收集標本，將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。標本2-8℃可保存48小時，-20℃可保存1個月。-70℃可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。

使用目的
本試劑盒用于測定猴血清、血漿及相關(guān)液體樣本中粒細胞集落刺激因子(G-CSF)含量。
實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中猴粒細胞集落刺激因子(G-CSF)水平。用純化的猴粒細胞集落刺激因子(G-CSF)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入粒細胞集落刺激因子(G-CSF)，再與HRP 標記的粒細胞集落刺激因子(G-CSF)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的粒細胞集落刺激因子(G-CSF)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），通過標準曲線計算樣品中猴粒細胞集落刺激因子(G-CSF)濃度。
試劑盒組成
1 30 倍濃縮洗滌液20ml×1 瓶7 終止液6ml×1 瓶
2 酶標試劑6ml×1 瓶8 標準品（2000ng/L） 0.5ml×1 瓶
3 酶標包被板12 孔×8 條9 標準品稀釋液1.5ml×1 瓶
4 樣品稀釋液6ml×1 瓶10 說明書1 份
5 顯色劑A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 張
6 顯色劑B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 個

操作步驟
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
1000ng/L 5 號標準品150μl 的原倍標準品加入150μl 標準品稀釋液
500ng/L 4 號標準品150μl 的5 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
250ng/L 3 號標準品150μl 的4 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
125ng/L 2 號標準品150μl 的3 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
62.5ng/L 1 號標準品150μl 的2 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5 倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液：將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒后棄去，如此重復(fù)5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。測定應(yīng)在加終止液后15 分鐘以內(nèi)進行。

代測范圍
1、本公司網(wǎng)站公布的試劑盒，可以提供代測服務(wù)。
2、本公司網(wǎng)站上尚未列出的試劑盒，可以代為研發(fā)和測定，費用等相關(guān)信息電話咨詢。

公司責任
1、對于客戶提供的樣品和要測定的指標，及時提供規(guī)范的檢測報告，確保數(shù)據(jù)真實可靠。未經(jīng)客戶允許，不得相關(guān)信息透露給第三方。

2、對于公司網(wǎng)站上列出的試劑盒測定指標，我們將在收到樣品之日起13個工作日內(nèi)提供規(guī)范的檢測報告；反之，提供檢測報告的時間由雙方協(xié)商決定。

3、本公司的人絲氨酸蛋白酶(PRSS)ELISA試劑盒 檢測報告僅對收到的樣品負責。為了確保測定結(jié)果有效，請客戶在送檢前與本公司客服人員溝通，并且按照要求做好樣品的數(shù)量、標簽和寄送等相關(guān)事宜。

4、客戶如果對測定結(jié)果不滿意，務(wù)必在收到檢測報告之日起起5個工作日內(nèi)與本公司客服人員聯(lián)系，商定解決辦法。

5、在收到客戶檢測費起5個工作日內(nèi)快遞寄送加蓋公章的紙質(zhì)檢測報告和發(fā)票。

客戶責任
1、提供樣品的性質(zhì)（物種和組織等）和處理狀況（有無特殊的化學(xué)處理等），確保樣品數(shù)量和標簽無誤，以符合要求的方式進行包裝和寄送（注意加足夠的冰袋冷藏，特別嬌貴的樣品請用干冰）。

2、及時付款。一般在寄送樣品時付費用的70%，收到電子版檢測報告，確認無誤后付剩下的30%。如有特殊情況需雙方協(xié)商決定。

3、以上單個樣品測定價格包括預(yù)測費用、試劑費用、人工費用和數(shù)據(jù)處理費用以及蛋白質(zhì)含量測定費用。由于統(tǒng)計處理需要，一般處理每個樣品應(yīng)該至少測定三次（強烈建議）。如果樣品中已經(jīng)包括三次或三次以上重復(fù)，或者用戶不需要重復(fù)測定，請用戶聲明。如果測定樣品數(shù)量很多，可以在測定的總費用上進行適當?shù)臏p免

代測的優(yōu)勢
1、將要測定的樣品都是有研發(fā)該試劑盒的專家全權(quán)負責的，因此可以確保測定結(jié)果的準確性。

2、節(jié)省客戶的寶貴時間和精力。
3、交給我們代測，您可以不必為操作經(jīng)驗的不成熟和儀器的缺乏而苦惱。
附加免費服務(wù)
1、根據(jù)客戶研究目的，免費提供專業(yè)的檢測意見和建議。
2、免費提供樣品蛋白質(zhì)含量測定。
3、免費提供測定結(jié)果分析，包括顯著性差異、指標變化的生理生化意義和相關(guān)指標變化之間的關(guān)系等。

注意事項

一、服務(wù)承諾：

凡購買本公司目錄任何一種酶聯(lián)免疫檢測試劑盒，您只需將需要檢測的動物（Human, Rat, Mouse, Rabbit, Monkey, Pig……）種類和檢測指標（白介素類、激素類）及標本數(shù)量（48T/96T）通知公司業(yè)務(wù)員即可。在接到客戶標本當日起，現(xiàn)貨產(chǎn)品二周內(nèi)將檢測報告交到客戶手中！
歡迎臨床醫(yī)學(xué)界和各科研單位在各種項目上與我們公司開展不同層次的密切合作，以雙贏求發(fā)展，共同進步，為中國檢測事業(yè)的發(fā)展積累經(jīng)驗。

二、樣本要求

在收集標本前都必須有一個完整的計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。我們提倡新鮮標本盡早檢測，對收集后當天就進行檢測的標本，及時儲存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶吮�，請造模取材后，將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。因冰室與室溫存在一定溫差，蛋白極易降解，直接影響實驗質(zhì)量，所以避免反復(fù)凍融。代測放免標本的客戶取材前須向我司銷售人員索要說明書，具體操作注意事項請與我司技術(shù)人員溝通。

液體類標本：標本必須為液體，不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。

血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

血漿：應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，加入10%（v/v）抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1%heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

尿液、胸腹水、腦脊液：用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.0-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin（抑肽酶）。用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清置于-20度或-70度保存，如有必要，可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

三、寄人絲氨酸蛋白酶(PRSS)ELISA試劑盒 標本時需注明以下情況：

1、標本編號；2、所測項目；3、是否做復(fù)孔；3、聯(lián)系方式；4、實驗后標本是否寄回。

客戶須知：

客戶應(yīng)對所提供的材料及信息負責，如因客戶提供的材料及信息不準確而引起的實驗延誤或經(jīng)濟損失由客戶承擔。

保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6 個月