二.樣品收集、處理及保存
1）.細胞培養(yǎng)上清：
適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2）細胞：
用PBS反復洗滌細胞3次，調(diào)整細胞濃度達到104-106/ml 左右，通過反復凍融，使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份，或者細胞超聲粉碎，離心取上清液檢測。
3）血清：
在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。
4）血漿：
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
5）體液：
包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6.）組織標本：
切取組織標本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進行檢測。
樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
7）保存：
如果樣品不能立即檢測，應將其分裝，-70 ℃保存，避免反復冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

三.ELISA試劑盒組成

產(chǎn)品組成	48孔配置	96孔配置	Storage
標準品：180ng/L	0.5ml×1瓶	0.5ml×1瓶	2-8℃
標準品稀釋液	1.5ml×1瓶	1.5ml×1瓶	2-8℃
酶標試劑	3ml×1瓶	6ml×1瓶	2-8℃
樣品稀釋液	3ml×1瓶	6ml×1瓶	2-8℃
顯色劑A液	3ml×1瓶	6ml×1瓶	2-8℃
顯色劑B液	3ml×1瓶	6ml×1瓶	2-8℃
終止液	3ml×1瓶	6ml×1瓶	2-8℃
濃縮洗滌液	（20ml×20倍）×1瓶	（20ml×30倍）×1瓶	2-8℃
酶標包被板	1×48	1×96	2-8℃
封板膜	2片	2片	RT
密封袋	1個	1個	RT
說明書	1份	1份	RT

四.操作步驟

五.實驗原理

人富組蛋白(histatin 5)ELISA試劑盒用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗體的微孔中依次加入標本或者標準品、生物素化的抗體、HRP標記的親和素，經(jīng)過徹底洗滌后用底物顯色。底物在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品濃度呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定OD值，計算樣品濃度。

實驗過程

加樣→ 孵育→ 檢測抗體→ 顯色→ 讀數(shù) →數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)處理及報告

繪制標準曲線：在Excel工作表中，以標準品濃度作橫坐標，對應OD值作縱坐標，繪制出標準品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。

六.標準曲線的繪制方法

可以采用各種繪圖軟件來繪制ELISA標準曲線，我公司以“Curve Exert1.3”軟件為例，繪制的ELISA標準曲線如下：

計算：以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度

七.配送服務

產(chǎn)品包裝：在采樣、發(fā)送、運輸過程中有保冷溫度要求的，公司均采用加厚款生物保溫箱，內(nèi)裝生物冰袋，有效的控制產(chǎn)品溫度，保證貨物質(zhì)量不受影響，同時并填充大量EPE發(fā)泡棉，具有優(yōu)越的緩沖彈性，它就像成千上萬的小彈簧緊緊地保護在郵寄物品周圍，它能有效的吸收嚴酷的沖擊力，使郵寄物品免于破損，保證貨物完好送達您手。

物流快遞：鑒于各快遞在全國各地承諾超配送范圍與全國行政區(qū)劃分有較大差異，以及快遞會對其配送范圍內(nèi)進行不定期調(diào)整，我們目前無法實現(xiàn)準確定位，但我們會盡力協(xié)助您解決問題。同時我們還為為上海市本地客戶可提供送貨上門服務，1個工作日送達。我司承諾，保障大家的貨物第一時間寄送，為大家提供快速、準確、安全、優(yōu)質(zhì)的配送服務。

人富組蛋白(histatin 5)ELISA試劑盒 源自先進酶聯(lián)免疫技術(shù)，涵蓋國內(nèi)外專家的經(jīng)驗與智慧。采用先進的技術(shù)和設(shè)備，確保品質(zhì)的同時，降低成本，為更多有需要的研究人員，節(jié)省實驗經(jīng)費，保證實驗質(zhì)量，多家生物科研基地合作伙伴，實力團隊傾力打造專注于elisa試劑盒的生產(chǎn)，研發(fā)，助力科研!

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